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我国是猕猴桃的起源和分布中心,资源极其非富。猕猴桃果实风味独特,富含维生素C、糖、多种人体必需氨基酸及其他营养成分,有“果中之王”的美称。植物的生长发育总是处于环境胁迫之中,它们严重影响着作物的产量。研究表明,提高植物体内Mn-SOD活性是增强植物抗逆性的有效途径之一。本试验通过根癌农杆菌介导将Mn-SOD基因导入美味猕猴桃,获得转化完整植株,选育具有高抗逆性的猕猴桃新品种。以美味猕猴桃优良品种海沃德和秦美组培苗为试材,以基本培养基、碳源、6-BA和生长素为试验因子,通过L9(34)正交试验,筛选出秦美离体叶片再生的理想培养基,即MS+6-BA4.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L。通过比较TDZ、ZT、6-BA和IBA对海沃德叶片再生的影响,获得海沃德最适培养基为MS+TDZ1.0mg/L+ IBA0.15mg/L,再生频率为82.2%,再生芽数为4.75。同时,研究了接种方式、AgNO3等因素对离体叶片再生效率的影响,进一步优化了叶片再生体系,从而建立了稳定高效的猕猴桃叶片再生体系。另外,以叶片再生不定芽为试材,进行了基本培养基和不同激素组合对猕猴桃增殖和生根的研究。在建立美味猕猴桃叶片再生体系的基础上,研究了Mn-SOD基因转化中影响叶片转化效率的多种因素,包括叶片预培养、Kan浓度、抑菌素浓度、浸染菌液以及Vir基因诱导因子等,从而确立了美味猕猴桃遗传转化体系。选取幼嫩叶平铺在分化培养基中预培养20d,然后剪成0.5cm2大小的叶块作为转化受体,用携带目的基因的农杆菌EHA105浸染10min,置于分化培养基上共培养3d,冲洗干净后,转接到选择分化培养基中。培养6~7周后,分化出抗性不定芽,及时将产生抗性芽的愈伤组织转接至抗性增殖培养基中,待抗性苗伸长到2cm后,从基部切下转接于抗性生根培养基中,3~4周后可获得转化完整植株。经GUS检测和PCR扩增,初步确认Mn-SOD基因已整合到猕猴桃植株基因组中。