背景：　　恶性肿瘤严重影响人类的生命健康，早期发现有利于患者改善预后和提高生存率。目前CT、MRI等影像技术能准确地诊断直径≥10mm的恶性肿瘤，但对发现直径更小的肿瘤仍有一定的困难，且在良恶性肿瘤的鉴别诊断方面仍存在一些不足 [1]。超声分子影像学的问世和发展为恶性肿瘤的早期诊断提供了有效的方法和手段。相关研究证实，具有高度特异性的靶向超声造影剂能在分子水平对肿瘤进行准确诊断[2]。其中，纳米级超声造影剂因其粒径小、穿透力强，可通过肿瘤的增强渗透和滞留效应（Enhanced permeability and retention effect，EPR）穿过肿瘤血管壁进入肿瘤组织间隙中，实现肿瘤实质细胞的超声分子显像[3,4]。肾透明细胞癌约占肾细胞癌的80%，其侵袭性很强，约 30%左右的病人在首次就诊时已发生转移[5，6]。由于碳酸酐酶IX （carbonic anhydrase IX，CAIX）在肾透明细胞癌组织中高表达，且其表达量的高低与患者的预后密切相关，已成为肾透明细胞癌特异性诊断和预后评估的靶点[7,8]。本课题组前期已经制备出了粒径≤700nm的靶向纳米泡，并通过实验证实了其能特异性聚集于肾透明细胞癌移植瘤组织中，实现肾透明细胞癌的超声分子显像[9,10]，但有关靶向纳米泡早期诊断微小肿瘤的能力及其在肿瘤形成和生长过程中的增强显像特征、规律及其机制尚缺乏深入研究。相关研究已经证实，人类肿瘤细胞在裸鼠上异种移植能较好保持原有肿瘤的形态学、生物学、生物化学特征，较好地模拟人类原发肿瘤的形成和生长过程。基于此，本研究拟应用携载CAIX多肽的靶向纳米泡动态监测肾透明细胞癌移植瘤的形成和生长过程，研究靶向纳米泡在超声分子显像动态评估移植瘤形成和生长过程中的应用价值，即通过研究靶向纳米泡用于早期诊断和动态监测移植瘤生长的能力，深入探讨和阐明靶向纳米泡在肾透明细胞癌移植瘤形成及生长过程中的超声分子显像特征、规律和机制。　　目的：　　应用携载 CAIX 多肽的靶向纳米泡动态评估裸鼠肾透明细胞癌移植瘤的形成过程，研究其在超声分子显像动态评估移植瘤形成过程中的应用价值，即研究携载CAIX多肽的靶向纳米泡在移植瘤形成过程的增强显像特征、规律及其诊断微小肿瘤的能力；同时动态评估和监测裸鼠肾透明细胞癌移植瘤的生长过程，阐明携载CAIX多肽的靶向纳米泡在移植瘤瘤生长过程中的增强显像特征和规律，并探索肿瘤组织内CAIX的表达量和微血管密度与靶向纳米泡峰值强度之间的相关性，为靶向纳米泡特异性诊断和监测肾透明细胞癌等高表达CAIX的恶性肿瘤提供实验依据和研究基础。　　方法：　　1.建立人肾透明细胞癌裸鼠皮下移植瘤模型，于种植后第 1 天行二维超声检查，于第7天及第14天分别行二维、彩色多普勒血流显像（color doppler flowimaging， CDFI）和超声造影检查，定量分析移植瘤组织和瘤旁正常组织中靶向纳米泡、空白纳米泡和微米泡的显像特点。同时应用免疫组织化学染色鉴定移植瘤组织和瘤旁组织中CAIX的表达情况。　　2. 建立人肾透明细胞癌皮下移植瘤裸鼠模型，于肿瘤形成后第1周、第2周、第3周、第 4周分别用靶向纳米泡、空白纳米泡及微米泡造影剂行超声造影检查，并定量分析三种造影剂在不同生长时期移植瘤组织内的显像特点和规律。应用免疫组织化学染色鉴定移植瘤组织内CAIX的表达以及微血管密度情况；应用WB检测对移植瘤组织内CAIX的表达情况进行半定量分析。对不同生长时期移植瘤组织内CAIX的表达量及微血管密度与靶向纳米泡峰值强度进行相关性分析。　　结果：　　1.移植瘤接种后第 7 天，二维图像显示接种部位表现为稍低回声，超声造影显示接种部位的增强模式为周围呈高增强，内部无增强。种植后第14天，超声造影显示种植部位的增强模式为高增强，提示细胞悬液已完全吸收，实性移植瘤组织形成。二维超声结合超声造影可发现直径小于1.5mm的微小肿瘤，且靶向纳米泡在峰值强度、峰值降半时间、峰值降半时曲线下面积等超声造影指标均优于空白纳米泡和微米泡（P＜0.05），免疫组织化学染色证实移植瘤组织内高表达 CAIX，而瘤旁组织未表达CAIX。　　2. 靶向纳米泡峰值强度在移植瘤形成后第1周、第2周无明显改变，在第3周、第4周峰值强度有降低趋势，差异有统计学意义（P＜0.05）；靶向纳米泡、空白纳米泡和微米泡的峰值强度在第1周、2周、3周和4周均有差异（P＜0.05），其中靶向纳米泡峰值强度高于空白纳米泡，且空白纳米泡峰值强度高于微米泡。免疫组织化学染色证实CAIX在荷瘤第四周组中表达明显降低，肿瘤微血管密度在荷瘤三周组和四周组有降低趋势。移植瘤组织WB检测显示，CAIX在荷瘤第四周组中表达降低。CAIX表达量与靶向纳米泡峰值强度相关性好（相关系数为 0.982，P=0.018），肿瘤组织微血管密度与靶向纳米泡峰值强度相关性好（相关系数为0.959，P=0.041）。　　结论：　　1.携载 CAIX 多肽的靶向纳米泡能使裸鼠肾透明细胞癌移植瘤组织特异性显像，能有效评估和监测移植瘤形成的过程，可发现直径小于1.5mm的微小肾透明细胞癌移植瘤，有利于肾透明细胞癌的早期诊断。　　2.携载 CAIX 多肽的靶向纳米泡在不同生长周期裸鼠移植瘤组织内峰值强度的变化规律与肿瘤组织内CAIX表达量的变化和肿瘤微血管密度高度相关，应用携载CAIX多肽的靶向纳米泡能有效评估和监测裸鼠肾透明细胞癌移植瘤的生长过程，本研究为应用靶向纳米泡进行恶性肿瘤的病程监测和预后评估提供了实验依据和研究基础。