论文部分内容阅读
目的:通过临床和动物实验,了解IL-18/IL-18BP与肝脏基质及血管之间的关系从而探讨其对肝癌发展、转移与治疗的作用。方法:收集原发性肝癌患者66例、肝脏非癌性占位患者23例手术前后的血清及30例正常人血清,应用ELISA检测其中IL-18、IL-18BP、VEGF的含量,比较各组血清IL-18、IL-18BP、VEGF的变化趋势及相互关系。将肝癌细胞(SMMC7721细胞)接种于裸鼠皮下制作移植瘤模型,20只移植瘤裸鼠模型随机分为两组,实验组用IL-18每日腹腔注射进行干预治疗,对照组裸鼠每天注射生理盐水,连续治疗30天后处死裸鼠,采用免疫组织化学技术(SP法)检测实验组、对照组移植瘤及正常裸鼠肝脏中MMPs、IL-18、IL-18BP、VEGF的分布及表达。结果:1.肝癌组、非癌性占位组和正常对照组血清IL-18、IL-18BP、VEGF检测结果:术前、术后血清VEGF、IL-18BP、IL-18水平在肝癌组和非癌性占位组中均高于正常对照组(P<0.05)。肝癌组及非癌性占位组中肝硬化脾肿大患者较无肝硬化患者具有更高的血清IL-18BP(P<0.05),术前血清IL-18BP与脾肿大正相关(r=0.559,P<0.05),术前IL-18与IL-18BP显著正相关(r=0.58,r=0.526,P<0.05)。肝癌组及非癌性占位组中术前肝功能异常者较肝功能正常者亦有明显高的血清IL-18水平(P<0.05)。两组手术后均出现血清VEGF的显著上升(P<0.05),血清IL-18BP水平在术后第3天到达上升高峰后出现逐步下降,直至术后一周,降至术前水平,而术后肝功能状态可直接影响术后IL-18水平的变化。2.正常裸鼠肝脏及移植瘤组织中MMPs、IL-18、IL-18BP、VEGF的表达:IL-18在移植瘤裸鼠动物模型中能显著抑制MMP2的表达,对照组>正常对照组>实验组(F=93.715,P<0.01);IL-18能抑制VEGF,却促进了MMP3、MMP9在移植瘤中的表达。在实验组与对照组中,IL-18与IL-18BP均存在正相关(r=0.67,r=0.657,P<0.05)。不同种类MMPs之间、MMPs与其他细胞因子间也存在相互关系。结论:1、肿瘤免疫环境刺激免疫细胞分泌IL-18,IL-18可能是经肝脏代谢后,通过胆汁排泄的,血清中IL-18水平直接受肝功能状态的影响,IL-18可作为肿瘤预后的评估指标。在体内肿瘤免疫环境中,IL-18对VEGF有抑制作用,能够抑制血管生成与肿瘤生长。IL-18对不同种类MMPs产生的作用不同,在肿瘤与非肿瘤环境中对MMPs产生的作用可能也不同。2、IL-18BP不仅受il-18水平影响,通过抑制IL-18发挥功效,可能还协同血管生成,促进原发性肝癌发展与转移。IL-18BP可能直接参与促进肿瘤转移的过程,不仅通过促进肿瘤血管增殖,还可能通过MMP3/MMP9等基质金属蛋白酶促进肿瘤转移。3、IL-18与IL-18BP虽然在占位组织内分泌部位不同,但占位刺激可以同时促进血清IL-18及IL-18BP的分泌,两者在血清与组织内表达均关系紧密。