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Rop是高等植物中一类分布广泛的小G蛋白,参与植物的多种生理过程的调控,在植物的细胞极性生长、器官发育、免疫,以及环境信号等多种生理过程充当分子开关的作用,介导相关信号向下游的传递。因此对Rop的研究有助于理解植物生长发育调控、生物和非生物胁迫应答、激素信号等过程的分子机制。水稻OsRac5是从雌雄蕊形成期的幼穗中分离得到的Rop家族成员。已有的研究提示,该基因可能参与调节水稻光周期育性转换相关的信号转导,涉及水稻的育性控制。但是有关其表达特性和确切的功能尚未见报道。采用实时荧光定量RCR技术,本研究分析了该基因在水稻生长发育的3个典型阶段的不同组织的表达情况,结果显示,OsRac5在不同时期的根、茎、叶、以及幼穗均有一定的表达,尤其以在雌雄蕊形成期幼穗中表达量最高,说明该基因与水稻生长发育等多种过程相关,且极有可能与水稻花器官的发育形成密切相关。本研究还检测了ABA、IAA、SA、6-BA、GA以及BR等6种植物激素对OsRac5基因表达的影响,检测结果显示,该基因对6种激素均有应答,其中ABA、GA、6-BA显著诱导OsRac5基因表达的上调,尤其以ABA、GA诱导OsRac5基因表达上调幅度最大;另外植物激素IAA能够显著抑制OsRac5基因的表达。该结果提示,OsRac5基因可能与多种激素应答过程相关。本研究也进行了干旱、高温、高盐等3种常见的非生物胁迫对OsRac5基因的研究。结果表明,干旱、低温、高盐等非生物胁迫也能诱导OsRac5基因的表达,但其表达模式具有不同的规律,其中相较于低温,该基因对干旱胁迫的应答更为灵敏,尤其是在地上部分;而在高盐胁迫下,该基因在地上部分的表达呈逐渐上升的趋势,且在处理的24h呈下降趋势,与地上部分相比较,在10h前根中该基因的表达趋势与之相反,但在处理24h时基因的表达显著上调。表达特性分析提示,该基因可能与多种非生物胁迫应答生理过程有关。为鉴定OsRac5的生物学功能,以实验室前期构建的激活型的OsRac5的过表达植物载体1300-MD转化拟南芥,筛选激活型OsRac5过表达的转基因拟南芥,目前已筛选获得F2代的转基因植株,并运用PCR技术进行了相关检测,证实目的基因片段已经整合到拟南芥基因组中,为进一步检测激活型OsRac5过表达对拟南芥生长发育的影响奠定基础。采用DNA重组技术,构建了OsRac5基因的RNAi载体pANDA-OsRac5,并连同实验室前期构建的该基因的野生型和激活型过表达植物载体1300-D和1300-MD分别转化水稻,T0代转基因水稻的筛选工作正在进行中。本研究系统分析了OsRac5基因的表达特性,并采用两种经典的转基因体系开展对该基因的功能鉴定,为获得转基因植株后,开展该基因过表达和沉默条件下水稻的表型分析、生理检测和分子鉴定等相关研究奠定基础,将有助于全面解析该基因在水稻生长发育、非生物胁迫和激素应答中的生物学功能。