RNA干扰抑制Survivin基因对鼠前列腺癌移植瘤生长的影响

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目的:研究采用RNA干扰抑制前列腺癌PC-3m细胞株中Survivin基因的表达,对鼠前列腺癌移植瘤生长的影响。材料和方法:应用前列腺癌PC-3m细胞体外培养,接种于裸鼠右季肋皮下致瘤,14天后随机分为三组:空白对照组、阴性对照组和实验组。利用已经成功构建的负载双片段survivin shRNA的腺病毒载体进行实验组瘤内多点注射,每两天一次,共5次。观察肿瘤的体积变化和肿瘤体积生长变化的时间曲线。30天后处死各组取肿瘤组织秤重、计算抑瘤率。免疫组织化学染色方法观察各组移植瘤组织中的Survivin蛋白表达变化,透射电镜观察前列腺癌细胞的超微结构变化。结果:常规病理证实前列腺癌动物模型成功建立。观察30天后最终空白对照组、阴性对照组和实验组分别体积为1504±24.58 mm~3、1578±23.08mm~3和670.4±15.82 mm~3,平均瘤重为2.20±0.27g、2.10±0.23g和0.89±0.20g,阴性组和实验组的抑瘤率为4.5%和59.5%,免疫组织化学结果显示Survivin蛋白表达各组分别为71.03±8.2% ,69.13±9.4%和45.37±11.6%,实验组和两对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),空白对照组和阴性对照组比较差异无显著性差异(P>0.05)。肿瘤的生长曲线提示生长受到了明显抑制。透射电镜观察到实验组细胞超微结构发生变化表现为;细胞体积变小,细胞质浓缩,胞内出现空泡,细胞核染色质固缩,核碎裂、边集,致密染色质块聚集于核膜下,一些细胞器如线粒体、内质网等肿胀,有凋亡小体形成。结论:采用RNA干扰抑制鼠移植瘤survivin基因表达后,能有效的抑制鼠移植瘤的生长并诱导PC-3m细胞凋亡,可能成为晚期前列腺癌治疗新方法。
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