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植物内生真菌(endophytic fungi)是指在植物的组织和器官中度过全部或部分生命历程,且对宿主不会明显致病的真菌。多数内生真菌不仅能产生与宿主相同或相似活性的次生代谢产物,而且产生的代谢产物多数有新颖的结构,是新型天然药物和新型无公害农药的关键来源。山豆根是豆科槐属越南槐的干燥根和根茎,富含生物碱、多糖以及黄酮类化合物,有消炎、抑制肿瘤以及抑菌等药理活性。目前国内外对山豆根内生真菌代谢产物鲜有研究。三七炭疽病、根腐病和黑斑病是三七栽培时的主要病害,影响严重了三七药材的质量。而本课题组前期研究发现,越南槐部分内生真菌对三七3种病原菌均有一定抑制活性。基于此,本文以三七3种病原菌为靶标菌,选择越南槐中抑菌活性较好的内生真菌菌株进行活性测试和形态学初步鉴定,并对其中抑菌活性最强的菌株TRXY-46的抑菌次级代谢产物进行研究。主要结果如下:(1)选择23株有较好活性的越南槐内生真菌菌株测试抑制三七的3种病原菌的活性,共有5株菌株对三七的3种病原菌抑制率都大于50%,具有潜在活性,值得进一步研究。(2)选择5株潜在活性菌株,测试其代谢产物对三七的3种病原菌的菌丝生长抑制效果,在2 mg/m L时,有2株菌株代谢产物对三七的3种病原菌抑制率都大于90%,分别是TRXY-46和TRPH-87,其中TRXY-46对三七的3种病原真菌抑制率都达到了100%,大于阳性对照(多菌灵),值得深入研究。(3)根据真菌的形态学鉴定结果,初步推断菌株TRXY-46和TRPH-87均是球孢菌属(Rhexocercosporidium sp.)真菌。(4)选择菌株TRXY-46通过大量发酵后,在其固体发酵产物中共分离获得15个单体化合物,根据理化性质、波谱特征以及与相关文献比较,最终确定了15个化合物的结构,没有发现新的天然化合物,但这15个化合物都是第一次从Rhexocercosporidium属内生真菌分离获得的,分别为:异肉豆蔻酸(1),除莠菌素A(2),除莠菌素B(3),除莠菌素F(4),2’-O-demethylherbicidine F(5),cyclo-(L-Tyr-L-Pro)(6),金雀异黄素(7),大豆甙元(8),6,4’-二羟基-7-甲氧基异黄酮(9),4-羟基苯乙酸(10),4-甲氧基苯乙酸(11),胡萝卜苷(12),丁二酸(13),2-羟基苯甲酸(14),二甲基异咯嗪(15)。(5)将分离获得的15个单体化合物进行体外抑制三七的3种病原菌的活性实验,共有6个化合物显示出一定的抑菌作用,分别是从TRXY-46菌株中分离获得的化合物2、化合物3、化合物4、化合物5、化合物10和化合物11。抗菌活性MIC值在512~32μg/m L之间,抑制三七根腐病病原菌(Fusarium solani)和三七黑斑病病原菌(Alternaria Panax Whetz.)活性最高的为4-羟基苯乙酸(10),其MIC值分别为64μg/m L和32μg/m L,抑制三七炭疽病病原菌(Colletotriehum gloeosporioides)活性最高的为4-甲氧基苯乙酸(11),其MIC值为32μg/m L,跟阳性对照多菌灵的抑制作用比较,这些化合物的抑菌效果都不强,没有表现出开发利用的价值。其他化合物无显示出抑菌活性。