【摘 要】
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目的:为充分利用入侵植物紫茎泽兰,本实验对其进行抗肝癌活性评价,并对活性部位的毒性与抗肝癌机制进行研究。方法:运用MTT法、Hoechst 33258染色、流式细胞术、免疫印迹法、
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目的:为充分利用入侵植物紫茎泽兰,本实验对其进行抗肝癌活性评价,并对活性部位的毒性与抗肝癌机制进行研究。方法:运用MTT法、Hoechst 33258染色、流式细胞术、免疫印迹法、免疫组化等方法分析紫茎泽兰各提取部位抗肝癌活性及活性部位体外抗肝癌机制。建立HepG2荷瘤裸鼠模型,腹腔注射的方式给药28天,检测实体瘤生长情况,并对瘤体的蛋白分子进行检测。结果:1.紫茎泽兰各提取部位皆具有一定的抗肝癌活性,其中挥发油(EAEO)是主要的活性部位。EAEO经气质联用技术分析,主要组分为倍半萜类。2.EAEO对肝癌细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖关系,但在较高剂量下对正常肝细胞的影响较小。3.EAEO能抑制肝癌细胞的迁移并阻滞细胞周期,引起凋亡。4.体内外Western blot结果显示,EAEO能对线粒体与内质网相关蛋白进行调节,上调促凋亡蛋白Bax,下调抑凋亡蛋白Bcl-2,并促进Caspase-3与Caspase-9的活化;EAEO能降低Grp78的表达,并促进Caspase-12与Caspase-7的活化;EAEO抑制STAT3与AKT的磷酸化程度,降低二者的核分布。结论:EAEO是紫茎泽兰的主要活性部位,能抑制肝癌细胞的增殖、迁移与生长周期,但对正常肝细胞影响较小。EAEO通过线粒体与内质网凋亡途径诱导肝癌凋亡并且具有抑制STAT3与AKT磷酸化的作用。以上表明,紫茎泽兰具有极大的开发应用潜力。
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