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应激性溃疡(stress ulcer, SU)是一种由严重的精神创伤、重大疾病、巨大的心理压力或药物和食物刺激,造成以炎症糜烂、浅表黏膜溃疡和出血为特点的急性胃黏膜病变。其以腹痛、反酸、食欲不振、呕血、黑便等为临床表现。若不及时治疗,有可能激发感染、穿孔或多器官功能障碍,甚者可致死亡。因此,运用针灸疗法对SU进行积极治疗,对降低应激性溃疡的发病率,控制其临床危害,降低其致死率和提高患者生活质量具有重要意义。消化系统疾病患者常伴有睡眠质量较低等情况。《黄帝内经》中就有关于胃肠疾病与睡眠关系的阐述:“阳明逆,不得从其道,故不得卧也。胃不和则卧不安,此之谓也”。传统医学认为饮食不洁、饥饱无常、情志过极均可导致胃气失于和降,胃脘气机壅滞不通,造成卫气夜晚不能入于阴而不眠,正所谓“胃不和则卧不安”。临床实践中,针灸和胃止痛的同时也能够改善睡眠质量。因此本实验以SU大鼠为动物模型,讨论应激性胃溃疡与睡眠障碍的联系,以血清和海马中的TNF-a, IL-25为指标,并观察针刺对应激性溃疡病程和睡眠质量的影响。[目的]本课题以无水乙醇灌胃法复制SU模型大鼠为研究对象,通过针刺干预“足三里”、“中脘”、“申脉”、“照海”四穴,观察SU模型大鼠的胃黏膜组织形态学、戊巴比妥钠诱导的大鼠睡眠诱导时间的变化,用酶联免疫法观察血清与海马中肿瘤坏死因子-α(TNF-a)和白介素-25(IL-25)含量的变化,旨在初步探讨胃肠功能与睡眠的相关性,并比较针刺不同穴组疗效的异同,观察针刺治疗后大鼠的探讨针刺不同穴位在应激性溃疡发病、发展、愈合中的作用,并研究SU与睡眠障碍间的联系,为针灸治疗该病提供一定实验依据。[方法](1)健康清洁级雄性wistar大鼠40只,常规适应性饲养7天后,按随机数字表随机分为5组:空白组、模型组、和胃组、安神组、联合组,每组8只。(2)模型组、和胃组、安神组、联合组采用无水乙醇灌胃法复制大鼠胃溃疡模型。(3)和胃组针刺大鼠双侧“足三里”、“中脘”,安神组针刺大鼠双侧“申脉”、“照海”,联合组针刺“足三里”、“中脘”、“申脉”、“照海”,每天1次,连续5天。空白组与模型组不针刺,每日抓取一次。(3)末次针刺治疗后按40mg/kg大鼠体重,腹腔注射2%戊巴比妥钠,记录大鼠睡眠诱导时间。(4)Guth法测定胃黏膜溃疡指数(ulcer index, UI).(5)HE染色法制作切片,光镜下观察胃黏膜组织形态学改变。(6)用酶联免疫法检测各组大鼠血清及海马中TNF-a及IL-25含量,并比较各组间差异。[结果](1)胃黏膜形态学:空白组胃黏膜表面光滑,无充血;模型组胃黏膜颜色较暗,可见大量点状出血灶,黏膜皱襞变浅,表面溃疡缺损形成;针刺各组胃黏膜出血点少于模型组,溃疡面积较小,黏膜皱襞尚清晰,轻度缺损,部分接近正常。(2)胃黏膜溃疡指数评分:空白组为零,与空白组比较,模型组大鼠显著升高(P<0.01);与模型组相较,针刺各组均显著降低(P<O.01);与安神组相较,和胃组、联合组显著降低(P<0.01);和胃组与联合组无统计学差异。(3)睡眠诱导时间:与空白组相较,模型组显著延长(P<0.01);与模型组相较,治疗各组显著缩短(P<0.01);与和胃组相较,联合组与安神组睡眠诱导时间缩短,具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);联合组与安神组睡眠诱导时间差异无统计学意义(P>0.05)。(4) TNF-a含量:血清中:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,和胃组与联合组含量降低,具有显著差异(P<0.01),安神组含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);联合组与和胃组比较,含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05),联合组与安神组比较,含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);安神组与和胃组比较,差异未见统计学意义(P>0.05)。海马中:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,和胃组、安神组、联合组含量降低,具有显著差异(P<0.01);与安神组相比,和胃组与联合组含量显著降低(P<0.01);和胃组与联合组差异无统计学意义。(5)IL-25含量:血清中:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,和胃组、安神组、联合组含量降低,具有显著差异(P<0.01);与安神组相比,和胃组含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05),联合组含量显著降低(P<0.01);和胃组与联合组差异无统计学意义。海马中:与空白组相比,模型组显著升高(P<0.01);与模型组相比,和胃组、安神组、联合组含量降低,具有显著差异(P<0.01);与安神组相比,和胃组含量显著降低(P<0.01),与联合组无统计学差异;和胃组与联合组差异无统计学意义。[结论]①针刺中脘、足三里、申脉、照海能够缩小胃黏膜溃疡面积,保护胃黏膜屏障,减轻胃黏膜损伤,和胃组及联合组的作用优于安神组。②无水乙醇灌胃造模后,大鼠戊巴比妥钠诱导的睡眠诱导时间可显著延长。③针刺治疗可明显缩短大鼠睡眠诱导时间,提升睡眠质量,安神组和联合组优于和胃组。④针刺中脘、足三里、申脉、照海四穴可调节血清及海马中TNF-a与IL-25的含量,联合组优于和胃组、安神组。⑤针刺促进胃黏膜损伤大鼠溃疡愈合,缩短睡眠诱导时间,可能是通过调节血清及海马中TNF-a与IL-25的含量实现。