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猪圆环病毒(PCV)是迄今发现的一种最小的动物病毒，现已知有PCV1和PCV2两种基因型。PCV1为非致病性PCV；PCV2具有致病性，与猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)、先天性震颤(CT)、猪间质性肺炎(IP)、猪皮炎肾炎综合症(PDNS)等有关。PCV2主要侵害5～16周龄的仔猪，引起仔猪渐进性消瘦、呼吸急促或困难、腹泻、贫血、皮肤苍白和全身淋巴结肿大，导致断奶后与生长期的猪生长迟缓及高死淘率，给世界养猪业造成了巨大的经济损失。
本研究参照GenBank中已发表的PCV2全基因组序列，设计合成两对引物，利用PCR方法扩增分离毒株GZ株、HN株、GD1株和GD2株全基因组，将PCR产物纯化后克隆到pMD18-T载体中，PCR鉴定阳性后进行序列测定，应用DNAstar分析软件与GenBank中已发表的其他毒株序列进行核苷酸及其氨基酸相似性比较，结果表明GZ株、HN株、GD1株和GD2株全长分别为1767bp、1768bp、1767bp、1767bp，与世界各地的PCV2全基因组序列核苷酸相似性在93.1％～99.9％之间，世界范围内PCV2毒株之间差异不大。而4个PCV2分离株之间全序列核苷酸相似性为97.1％～98.6％，与欧、美部分毒株亲缘关系较近。
本研究通过设计引物，优化LAMP反应体系和反应条件，成功建立了PCV2的LAMP检测方法，PCV2 LAMP在63℃1h内能够成功的检测猪圆环病毒2型病毒；其敏感度可以达到10个拷贝的PCV2 DNA，LAMP扩增技术是一种检测程序简单、灵敏度和特异性较高的基因检测手段，在猪圆环病毒2型的快速检测方面具有较强优势。
本研究设计PCV2 tORF2的原核表达引物，引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点，制备克隆质粒pMD18T-TORF2，经过测序将阳性质粒酶切，将酶切产物插入pET—32a，构建的表达质粒pET-TORF2转化RosettaⅡ感受态细胞并诱导表达，并对表达的外源蛋白做SDS-PAGE分析和Western—blot分析，结果表明原核表达载体pET—32a能成功表达tORF2，重组蛋白能与猪PCV2多抗血清发生特异性反应，重组蛋白有良好的免疫原性。
本研究通过设计引物，引入相应的酶切位点，分别扩增出PCV2 ORF2和PRRSVORF5，制备克隆质粒，并经过测序及酶切，将外源基因分别插入经改造的杆状病毒穿梭载体pFVC，获得3种重组质粒pFVC—ORF2、pFVC—ORF5、pFVC—ORF5—ORF2。经过质粒PCR和测序鉴定后，将重组质粒pFVC—ORF2、pFVC—ORF5、pFVC—ORF5—ORF2分别转化带有杆状病毒骨架的DH10BacTME.coli感受态中进行同源重组。挑出阳性克隆进行PCR鉴定后，提取高质量的重组杆粒rBacmid—ORF2、rBacmid—ORF5、rBacmid—ORF5—ORF2，经脂质体介导将重组杆粒转染Sf9细胞，获取重组病毒rAc—ORF2、rAc—ORF5、rAc—ORF5—ORF2。通过间接免疫荧光检测证实了外源基因正确表达。重组杆状病毒rAc—ORF2、rAc—ORF5、rAc—ORF5—ORF2对BALB/c小鼠的免疫实验，结果显示rAc—ORF2、rAc—ORF5、rAc—ORF5—ORF2均能够刺激小鼠机体产生抗体，并能持续较长时间。