纤维素酶被广泛应用于食品，酿酒，纺织，农业等各个领域。纤维素酶将纤维素降解成单糖后，再通过微生物发酵的方法将葡萄糖转变成乙醇，最终将乙醇作为能源使用，还可以缓解环境污染和能源危机的问题，但是纤维素酶表达量和发酵酶活都较低的问题制约了纤维素酶的应用。Cel5G是本实验室发现的新β-1，4葡聚糖内切酶，属于糖苷水解酶第五家族。本文对cel5G基因进行了基因改造和换用酵母表达两个方面进行了研究。　　 纤维素结合域(CBD)可以修改纤维素的性质，促进纤维素酶与不溶性底物的结合，在纤维原料酶的降解中具有重要的作用。通过实验证明Cel5G并不能很好的降解微晶纤维素。本文将cel5G基因分别与来自真菌的Trichoderma reesei二糖水解酶Ⅰ(CBHⅠ)和来源于细菌的Clostridium cellulovorans的纤维素结合蛋白A(CbpA)两种纤维素结合域基因进行了融合表达。采用的表达载体是pET29a，宿主菌是大肠杆菌BL21。两种CBD都实现了与cel5G基因的融合表达，通过诱导，破碎后，用破碎上清进行了一系列的酶学性质的研究，以原始酶为对照，得出与真菌CBD融合表达的重组酶表现出了对微晶纤维素一定的结合能力，且对微晶纤维素的水解能力也比原始酶提高了3倍。而细菌CBD融合表达的重组酶并没有表现出相应的酶的功能。　　 大肠杆菌表达存在易形成包涵体和不易纯化的问题，而巴斯德毕赤酵母具有产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等优势，更适用于工业化生产。通过实验我们实现了将cel5G基因克隆到酵母穿梭质粒pEFaA上，并通过电转化的方法将其转化进了巴斯德毕赤酵母GS115中进行表达。通过酶活的测定和SDS-PAGE电泳，确定得到了我们所需的目的蛋白，并且发酵上清中杂蛋白含量很低，更适合蛋白的进一步纯化。我们并对表达蛋白进行了一系列的酶学性质的研究，得出其最适反应温度在50℃，最适反应pH值在4.8，其在pH3.0-10.0均可稳定存在，在50℃保温30分钟仍可保持80％的活力。