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以半夏叶柄试验材料,采用单因素试验研究不同基本培养基、蔗糖浓度、植物生长调节物质对半夏疏松愈伤组织诱导的影响,确定半夏形成疏松愈伤组织的关键因素;并结合显微结构观察、化学成分定位和组分含量测定等方法,比较半夏疏松愈伤组织与致密愈伤组织的特点,初步阐明半夏疏松愈伤组织形成的机理。主要研究结果如下:(1)基本培养基、植物生长调节物质的不同浓度组合、不同蔗糖浓度对半夏疏松愈伤组织诱导有不同的影响。用半夏叶柄作为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D1.0 mg·L-1+6-BA 1.5 m g·L-1诱导出的愈伤组织生长情况较好且疏松程度高;以MS+2,4-D1.0 mg·L-1+6-BA 1.5 mg·L-1为诱导培养基,设置不同蔗糖浓度的(0、15、25、30、35 g·L-1)单因素试验,筛选出蔗糖浓度为30 g·L-1时,愈伤组织长势较好且疏松程度高;设置不同浓度的6-BA(0.5、1.0、1.5 mg·L-1)、2,4-D(1.0、1.5、2.0 mg·L-1)的组合试验,筛选出诱导半夏疏松愈伤组织的最佳激素组合,即在基本培养基中添加1 mg·L-12,4-D和1 mg·L-1 6-BA。并总结出半夏疏松愈伤组织形成的关键因素为基本培养基(MS)、蔗糖(30 g·L-1)、植物生长调节物质(1 mg·L-1 2,4-D+1 mg·L-1 6-BA)。(2)半夏疏松愈伤组织的结构较松散,细胞及胞间间隙较大,细胞壁较薄。致密愈伤组织的化学成分定位显示,其细胞壁及细胞间隙中同时存在着色为绿色的纤维素部分及着色为紫色的果胶和纤维素的混合部分,绿色较深,说明其细胞壁纤维素含量较高;而紫色部分较浅,说明其果胶含量较低,即中胶层中细胞粘结物果胶质很少水解成果胶,细胞间连接紧密。疏松愈伤组织的化学成分定位显示出细胞壁及细胞间隙几乎仅存在着色为紫色的果胶与纤维素的混合部分,颜色较深,说明其果胶含量较高,即中胶层中细胞粘结物果胶质大量水解成果胶,细胞间连接被解除,使其愈伤组织细胞松散;而绿色极少,说明其细胞壁纤维素合成较少,含量甚微,使细胞壁刚性减弱,细胞生长加快。(3)半夏愈伤组织的疏松或致密程度主要与果胶质和纤维素有密切关系。果胶质主要位于细胞间中胶层,是粘结相邻细胞、使组织坚实的重要成分;纤维素是细胞壁的主要成分,是维持植物细胞形态、增强细胞机械强度的物质,因其具有刚性而在一定程度上限制细胞的生长。