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种植材料的表面特性直接影响成骨细胞的黏附、增殖及分化,被广泛认为足影响骨结合的主要因素之一。其中,具有生物活性的种植材料表面具有骨传导及骨诱导作用,能早期促进成骨细胞黏附、增殖以及分化,从而获得早期骨结合。常用的体外检测材料生物活性模型为仿生溶液(simulated body fluid,SBF),然而该模型缺乏与骨结合过程密切相关的有机蛋白,其准确性尚存在争议;另一方面,材料的宏观形貌也可影响磷灰石形成。本实验对临床上应用的三种宏观形貌一致但不同表面处理方式的种植体(喷砂处理的LTX、双酸蚀处理的Osseotite(R)以及离散晶体沉积法处理的Nano Tite TM)进行表面特征分析,并应用体外模拟体液对三种种植体进行表面生物活性分析,同时通过比较种植体在仿生溶液与细胞培养液中诱导磷灰石形成的差异,探讨不同介质对磷灰石形成的影响。
第一章商用牙种植体表面特征分析
目的:比较三种不同表面处理的商用牙种植体表面特征的差异。
方法:应用非接触式共聚焦干涉仪分别对LTX、Osseotite(R)和NanoTiteTM三种种植体表面粗糙度进行检测;采用扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察样品表面形貌,并用自带的X射线能谱仪(energy dispersive X-ray spectrometer,EDS)分析样品表面相对元素含量;应用X-射线光电子能谱仪(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)对三种种植体表面元素含量及化学组分进行分析。
结果:LTX、Osseotite(R)和NanoTiteTM的平均粗糙度Ra分别为1.14±0.08μm、0.49±0.02μm和0.58±0.05μm。喷砂处理的LTX形成不规则粗糙表面;双酸蚀处理Osseotite(R)表面形成较为规则的细致的波浪状窝洞;经离散晶体沉积处理的NanoTiteTM表面低倍镜下形貌无明显改变,高倍镜下可见纳米级晶体散在覆盖在原表面,约占总面积的30%。XPS结果显示LTX表面存在喷砂介质钙磷化合物残留;Osseotite(R)表面主要为TiO2,氧化层较薄;NanoTiteTM表面纳米晶体的化学组成为磷酸八钙。
结论:喷砂、双酸蚀和离散晶体沉积法处理的三种种植体表面形貌及化学组成具有特征性变化。
第二章种植体在模拟体液中诱导磷灰石形成的研究
目的:比较三种外形一致但不同表面处理的种植体生物活性及不同检测模型对磷灰石形成的影响。
方法:将LTX、Osseotite(R)和NanoTiteTM分别在SBF和DMEM中浸泡14、28天,应用SEM、EDS和XPS分析各样本体外诱导磷灰石形成的能力以及表面沉积物的形貌及组分。
结果:在SBF中浸泡后,LTX、Osseotite(R)表面形貌无明显变化,XPS显示LTX、Osseotite(R)表面少量Ca、P沉积;NanoTiteTM根部平面表面见晶体体积及密度增大,部分金属基底暴露,沉积物为羟基磷灰石,螺纹凹槽部位可见纳米级不规则晶体与微米级方形晶体混合存在。在DMEM中浸泡后,LTX表面形貌无明显变化;Osseotite(R)表面可见薄层沉积物形成,但未见明显晶体形成,XPS可检测得磷酸八钙沉积;NanoTiteTM表面见大量由磷酸八钙晶体和碳酸羟基磷灰石晶体形成并成球状聚集,完全覆盖金属基底。XPS显示有机大分子吸附与钙磷化合物沉积共同形成吸附层覆盖于各样本表面。
结论:Nano Tite TM表面具有更良好的诱导磷灰石能力。有机大分子对种植体表面诱导磷灰石形成具有显著影响。