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【目的】观察携带ω-3脂肪酸不饱和酶（fat-1）基因从而使体内ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸比例趋于平衡的mfat-1小鼠，在高脂饮食后血清胆固醇水平、胆固醇合成与吸收效率的改变，以探讨ω-3多不饱和脂肪酸对胆固醇代谢的相关机制。【方法】1.将mfat-1小鼠（由南京医科大学赵子健、戴一凡教授馈赠）与C57BL/6小鼠杂交繁殖，提取鼠尾基因组DNA，半定量RT-PCR鉴定子代小鼠目的基因的表达。2.随机挑选8周龄mfat-1及C57BL/6雄性小鼠各12只分别作为实验组和对照组，普通饮食适应性喂养2周改为高脂饲料，4周后通过心脏采血并剪取肝脏组织，进行检测。3.气相色谱分析法检测小鼠血清总胆固醇、胆固醇代谢标志物水平，用外标单点法定量测定血清中胆固醇含量；内标单点法定量测定胆固醇合成标志物（角鲨烯、2,4-脱氢胆甾烷醇）及吸收标志物（菜油固醇、β-谷固醇、豆固醇）含量。4.氯仿-甲醇提取法提取肝脏组织中的脂质，酯化后进行气相色谱分析，通过将保留时间与标准品对比，分析小鼠肝脏膜脂质内二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA）、二十二碳六烯酸（docosahexenoic acid，DHA）、二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid，DPA）、α-亚麻酸（α-linolenicacid，ALA）、亚油酸（linoleic acid，LA）、花生四烯酸（arachidonic acid，AA）的百分含量。5.ELISA定量分析检测小鼠肝脏中胆固醇合成限速酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（3-Hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase，HMG-COAR）的水平。【结果】1.半定量PCR鉴定ω-3脂肪酸去饱和酶（fat-1）基因在子代mfat-1小鼠中成功表达。2.实验组小鼠肝脏脂质内总ω-3多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fattyacids，PUFAs）的百分含量为8.06±0.76，总ω-6PUFAs百分含量为13.71±0.98，总ω-6/ω-3PUFAs比例显著低于对照组（1.70vs.6.04p<0.01）。3.实验组小鼠血清中总胆固醇水平较对照组降低（0.91±0.07比1.16±0.85,p＜0.01,mg/mL）。胆固醇合成标志物（角鲨烯、2,4-脱氢胆甾烷醇）水平明显低于对照组（分别为0.63±0.17vs.1.24±0.36，3.89±0.54vs.6.57±1.06p<0.05,ug/mL），胆固醇吸收标志物（菜油固醇、β-谷固醇、豆固醇）水平也显著低于对照组（分别为16.10±2.28比21.24±2.96、1.07±0.18比1.76±0.43、28.78±5.60比42.30±5.81,p＜0.01,ug/mL）。4.肝脏内胆固醇合成限速酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的水平较对照组显著降低（379.76±22.37比443.98±27.99,p<0.01,U/L）。【结论】1.ω-3脂肪酸不饱和酶基因成功表达使mfat-1小鼠体内ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸含量趋于平衡。2.mfat-1小鼠血中总胆固醇水平明显低于野生型，主要通过抑制胆固醇的合成与吸收两种途径降低体内总胆固醇水平。3.mfat-1小鼠抑制胆固醇合成的途径之一可能是抑制肝脏内3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的水平。