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目的临床观察和流行病学资料分析显示肥胖患者,特别是中心性肥胖并有肝脏脂肪组织聚集(如脂肪肝)时,血浆HDL-C水平降低明显,但其具体细胞和分子机制尚未明确。目前对脂肪组织的认识已经从以前的能量储存器官更新至具有旺盛内分泌功能的内分泌器官。脂肪细胞是否能通过内分泌或旁分泌的多种细胞因子和活性物质影响与肝脏HDL密切相关的蛋白,进而导致HDL-C水平和功能的异常?本实验采用细胞共培养模型,探讨在与脂肪细胞共培养的情况下,HepG2细胞上与HDL密切相关的apoAI,ApoM,SAA的mRNA及蛋白表达水平是否受影响,从细胞水平推论肥胖与HDL水平及功能异常的机制。方法采用胰岛素、地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导3T3-L1前脂肪细胞分化成为成熟脂肪细胞。通过Transwell系统(膜孔径0.4μm)进行HepG2细胞和成熟脂肪细胞的共培养,以未分化的3T3细胞共培养以及单独HepG2细胞培养两组作为对照。共培养48小时后收集HepG2细胞,提取RNA和蛋白,Western Blot检测apoAI、ApoM蛋白水平和RT-PCR检测SAA基因mRNA水平。结果1.采用Transwell系统成功建立3T3-L1脂肪细胞和人肝癌细胞株HpeG2细胞共培养的实验模型;2.免疫印迹(Western Blot)显示,与对照组比较,分化成熟的脂肪细胞共培养抑制HpeG2细胞apoAI、ApoM蛋白表达。3.RT-PCR分析显示,与对照组比较,共培养使HpeG2细胞SAA基因mRNA水平上调。结论1.成熟的脂肪细胞可抑制HpeG2细胞apoAI及ApoM蛋白表达,可能是肥胖导致HDL-C水平降低的原因之一。2.成熟的脂肪细胞可促进HpeG2细胞表达SAA,可能是肥胖导致HDL功能减退的原因之一。