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背景:研究表明Ⅰ型胶原与骨质疏松症(Osteoporosis, OP)有着密切联系。Ⅰ型胶原由Colla1及Colla2基因编码,可受转化生长因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)调控。TGF-β1、 TGF-β2是TGF-βs的两个异构体。中药龟鹿二仙胶可以治疗骨质疏松症,以往研究多以临床疗效观察为主,与Ⅰ型胶原有关的研究较少。目的:研究龟鹿二仙胶对成骨细胞Ⅰ型胶原基因表达的影响,探索龟鹿二仙胶治疗OP的机制。方法:取SD大鼠100只,随机分为空白组、龟鹿二仙胶组(低剂量)、龟鹿二仙胶组(中剂量)、龟鹿二仙胶组(高剂量)、骨化三醇组。每天灌胃1次,持续7d,末次给药2h后腹主动脉采血制成含药血清条件培养基培养成骨细胞。通过MTT法及活细胞形态观察来了解含药血清对成骨细胞增殖及凋亡的影响。应用Western Blot法检测各组成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β蛋白表达水平。运用PCR (RT-PCR)技术检测各组成骨细胞Ⅰ型胶原及TGF-β的mRNA表达。结果:(1)MTT结果显示:龟鹿二仙胶各组的成骨细胞无明显增殖。骨化三醇组的成骨细胞有明显增殖(P<0.05)。细胞活细胞染色提示:骨化三醇组及龟鹿二仙胶各组的成骨细胞无显著的凋亡。(2) RT-PCR法结果显示:骨化三醇组与龟鹿二仙胶各组Colla1及Colla2mRNA的水平均有增加(P<0.01);龟鹿二仙胶中、高剂量组Colla1及Colla2mRNA水平增加较明显(P<0.05),龟鹿二仙胶高剂量组较中剂量组Colla1及Colla2mRNA水平增加不明显(P>0.05);骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2 mRNA水平无明显变化(p>0.05);龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2 mRNA水平均有增加(P<0.01);且龟鹿二仙胶中、高剂量组TGF-β1、TGF-β2 mRNA水平增加一致,比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3) Western blot结果提示:第24小时,龟鹿二仙胶高剂量组能使成骨细胞Colla1及Colla2蛋白合成增加(P<0.05)。第48小时,骨化三醇组、龟鹿二仙胶各组均能使成骨细Colla1及Colla2蛋白合成增加(P<0.01);龟鹿二仙胶高、中剂量组之间比较差异没有统计学意义(P>0.05);第24、48小时,骨化三醇组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P>0.05);在24小时,龟鹿二仙胶高剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成有显著增强(P<0.01),龟鹿二仙胶低、中剂量组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成无明显变化(P>0.05);48小时,龟鹿二仙胶各组TGF-β1及TGF-β2蛋白合成增加(P<0.01)。龟鹿二仙胶高、中剂量组之间无显著区别(P>0.05)。结论:龟鹿二仙胶可以促进Ⅰ型胶原基因的表达,其机制可能与调节细胞因子TGF-β有关。