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背景:
肥胖是一种由多因素引起的慢性代谢性疾病,现有的证据表明:超重和肥胖常与高血压、糖尿病、高脂血症等多个心血管疾病危险因子在同一个体中聚集,导致心脑血管疾病发生或加重,称为“代谢综合征(MetablolicSyndrome,MS)”或“死亡四联征”,肥胖已成为全球性的重要公共卫生问题。针对肥胖开展现场调查及分子流行病学研究,对肥胖的病因干预、早期诊断及个体化预防和治疗均有重要的理论价值和科学意义,并有利于改善现有的疾病防治体系,降低肥胖及相关疾病的发病率,进而带来巨大的社会效益和经济效益。
PYY(peptideYY)是近年来新发现的一种由消化道远端黏膜L细胞分泌的食欲调节激素,主要调节食物的摄入,与肥胖的发生密切相关。
目前关于PYY及其受体基因多态性的研究国外仅有个别报道,标签SNP是否在不同的地区和种族存在差异,在中国的人群是否存在基因多态性,并且与肥胖是否存在关联性,鉴于以上问题,构成了本研究的设计思路和研究目的。
目的:
检测河南农村居民肥胖人群PYY基因及其受体基因的多态性,并讨论PYY基因多态性、PYY受体基因的多态性与肥胖易感性的关系研究。
方法:
1.本研究包括410例肥胖患者和410例非肥胖人群,抽取河南省某地区符合条件的410名肥胖病例,同时选取生活在同一地区按性别、年龄为匹配条件的非肥胖的410名对照进行成组病例对照分析。
2.实验室方法:本实验采用血液DNA小量试剂盒提取全血DNA,rs2880412、rs2880416、rs1047214三个位点的基因多态性采用PCR-RFLP法,采用卡方检验分析病例组和对照组中等位基因型以及等位基因的分布差异,采用logistic回归分析调整文化程度、婚姻状况、职业、家庭月人均收入后的OR值和95%的置信区间。采用SNPHAP2.1软件连锁强度大的SNPs进行haplotype型的估计分析和比较,并分析不同基因的不同位点间进行基因型联合作用对肥胖发生的影响,对三个位点进行位点突变数量以及等位基因突变数量的趋势分析。
结果:
1.PYY及其受体基因多态性与肥胖易感性的关系
位点rs2880412:病例组和对照组中的纯合基因型AA、CC的分布差异具有统计学意义(P<0.05),两基因型在病例组和对照组中的频率为31.2%、15.9%和25.6%、22.7%;杂合基因型AC、AC+CC分布没有统计学差异(P>0.05),与AA基因型相比较,AC、AC+CC基因型与肥胖无统计学差异(P>0.05),CC与肥胖分布差异有统计学差异(P<0.05)。A、C等位基因在两组中的分布差异具有统计学意义(x2=6.40,P<0.05),其等位基因所占的比例分别为57.7%、48.5%和51.5%、42.3%。与A等位基因相比较,C等位基因是肥胖的易感性等位基因(OR=1.29,95%CI:1.06~1.56)。
位点rs2880416:在病例组和对照组中基因型CC、CG、CG+CC的分布差异具有统计学意义(P<0.05),且该三种基因型在病例组和对照组中的频率分别为10.5%、47.6%、4.9%、27.1%和68.0%、95.1%。与GG基因型相比较,CC、CG、CG+GG基因型分布具有统计学差异(P<0.05),G、C等位基因在两组中的分布差异具有统计学意义(x2=53.81,P<0.05),其所占的比例分别为34.3%、65.9%和18.4%、81.6%。以G等位基因作为参照,C是肥胖发生易感性的等位基因(OR=2.31,95%CI:1.84~2.90)。
位点rs1047214:两组中基因型TT、TC、CC以及TC+CC的分布差异没有统计学意义(P>0.05),与TT基因型相比较,TC、CC、TC+CC基因型与肥胖无关联,和1.03(0.76~1.38)。T、C等位基因在两组中的分布没有统计学差异(x2=0.04,P>0.05),其在病例组与对照组中所占的比例分别为82.8%、17.2%和84.0%、16.0%。
2.PYY基因多态性的单体型分析
本研究的位点可以构建4种单体型CA、CC、GA、GC,以CA作为对照单体型,CC与肥胖的易感性没有关联(P>0.05);GA、GC与肥胖的易感性有关联(P<0.05)。其基因型的OR值及其95%CI分别为2.64(2.00~3.49)和2.44(1.86~3.19)。
3.rs2880412、rs2880416、rs1047214三个位点的联合基因型分析
以联合基因AAGGTT作为对照基因型,分析联合基因型是否与肥胖易感性相关,结果显示联合基因型AACCTT、AACCTC、ACCCTC、AAGCTC、AAGCCC、CCGCTT、AAGGTC、ACGGTT、ACGGTC、CCGGTC与肥胖无相关(P>0.05),联合基因型ACCCTT、AAGCTT、ACGCTT、CCGCTT、CCGGCC与肥胖易感性相关(P<0.05),OR值及其95%CI分别为0.11(0.01~0.97)、0.37(0.18~0.77)、0.48(0.26~0.87)、2.02(1.06~3.82)、0.08(0.01~0.68)。
4.rs2880412、rs2880416、rs1047214位点的突变数量的趋势分析
以rs2880412、rs2880416、rs1047214三个位点中的AAGGTT为参照基因,分析位点突变数量(1、2、3)的基因型与肥胖易感性的关系。分析结果显示肥胖的发病危险随着位点突变个数的增加而发生增加的趋势(趋势卡方检验x2=13.70,P<0.05)。
对PYY基因及其受体基因位点的等位基因突变数量与肥胖发病风险进行趋势分析,三个位点的A、G、T作为零突变数作为参照,结果发现等位基因的0、1、2、3、4、5突变个数的增加与肥胖的风险性增加变化趋势检有统计学差异(趋势卡方检验x2=9.89,P<0.05)。研究结果发现:与等位基因突变数为0时进行比较,当突变数量为4时能够增加肥胖的发病风险,OR值及其95%CI分别为4.00(1.44~11.08)。
结论:
1.rs2880412、rs2880416位点的多态性与肥胖发生的易感性有统计学关联,等位基因C、C是肥胖发生的危险因素。rs1047214等位基因C与T等位基因相比较,表明C等位基因不是肥胖发生的危险因素。
2.对rs2880412、rs2880416两个位点构建的4中单体型预测和三个位点的联合基因型分析表明三个位点存在交互作用。
3.对rs2880412、rs2880416、rs1047214三个位点进行趋势检验,在位点突变个数为3和三个位点的等位基因总突变数量为4时,能够增加肥胖发生的易感性。且肥胖的发病危险随着位点的突变个数和等位基因突变数量的增加发生增加趋势。