油茶炭疽病拮抗放线菌CF17抑菌成分及结构鉴定

来源 :中南林业科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hu549881262
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
油茶(Camellia oleifera)是我国重要的油料作物,茶油中的不饱和脂肪酸、茶多糖和微量物质能预防人体多种疾病,具有很高的经济价值。随着油茶产业的不断发展,油茶病虫害日趋严重,其中油茶炭疽病(Camellia oleifera anthracnose)是油茶产区的主要病害之一,严重影响了油茶的产量与质量。当前化学农药的泛滥使用,造成环境污染、农药残留、生态破坏和茶油品质下降等一系列问题,因此,油茶病虫害的高效、安全、绿色生物防控成为当前研究热点。本实验室筛选出一株对油茶炭疽病有很强抑制作用的油茶拮抗放线菌CF17,为了更好的为生防菌株CF17林间应用提供奠定理论基础,本论文主要以放线菌CF17发酵液为研究对象,研究了其抑菌谱,并采用丙酮沉淀法、SPE固相萃取法、高效液相色谱法和质谱法对油茶炭疽病拮抗放线菌CF17抑菌物质进行分离纯化及鉴定。研究主要结果如下:(1)油茶炭疽病拮抗放线菌CF17抑菌物质分离。放线菌CF17进行液体发酵得到CF17发酵液,对发酵液进行抑菌谱测定发现,放线菌CF17对炭疽属病原菌抑菌率达到90%以上,具有用于生物农药开发的前景。对CF17无菌发酵液通过乙醇沉淀法、乙酸乙酯沉淀法、丙酮沉淀法进行抑菌物质活性对比,筛选出丙酮沉淀方法为最佳提取方法。通过设置30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%不同丙酮浓度提取发酵液进行抑菌实验,筛选出50%的丙酮浓度为最佳提取浓度,其抑菌圈达到19.50mm,并能很好的分离发酵液中的杂质。(2)油茶炭疽病拮抗放线菌CF17抑菌物质纯化。对CF17抑菌粗提物进行固相萃取分离纯化,以乙腈为洗脱液,设置0%、10%、60%、100%不同浓度的乙腈洗脱萃取柱,经过抑菌实验结果表明CF17抑菌物质全部存在于60%的洗脱液中。对经固相萃取后的抑菌物质进行半制备高效液相色谱纯化,按时间段收集到11个组分,抑菌实验结果表明仅只有6号(25-30min)组分能产生明显抑菌圈;根据液相色潜峰强度收集到23个组分并进行抑菌实验,结果表明仅15号组分色谱峰保留时间27.21min处能产生明显抑菌圈,抑菌圈大小为19.55mm,与分时间段收集组分抑菌实验相符。优化后的色谱条件分析色谱峰保留时间17.2min处组分,结果表明17.21min处组分主要存在两种抑菌物质,分别为保留时问32.58min处抑菌物质与保留时间37.51min处抑菌物质,且色谱峰纯度达到质谱检测要求。(3)油茶炭疽病拮抗放线菌CF17抑菌物质鉴定。通过离子阱质谱对放线菌CF17抑菌物质进行结构解析,通过一级二级质谱进行分析,并通过与质谱数据库比对,鉴定CF17抑菌物质结构。保留时间32.58min处抑菌物质通过离子阱质谱推断为Tetrin B,分子式为C34H51NO14;保留时间37.51min处抑菌物质为Tetramycin A,分子式为C35H53NO13。放线菌CF17所产生抑菌物质是一类四烯大环内酯类的抗生素,它不仅对大多数真菌性病害有抑制作用,而且能通过提高植株生长素与防御酶活性,促进植株生长,提升植株抗病能力。
其他文献
本文同时采用分离和电镜扫描技术研究了光滑足距小蠹 Xylosandrus germanus(Blandford)不同发育阶段坑道和贮菌器内真菌种类的组成和变化.Ambrosiella hartigii足光滑足距小
在我50岁出头的时候,组织决定让我退休(后改为离休)。我一直想不通:按我预定的人生轨迹,还应该再为国家干几年,这么早休息,不是浪费人才吗?于是,我整天郁郁寡欢,饭吃不下,觉
期刊
本文以内蒙古自治区鄂尔多斯市近十年来选育的10余个大果沙棘品种为研究对象,从成活率、生长特性、适应性等多个方面系统研究了不同品种在全光照自动喷雾条件下不同种源大果
百合为百合科百合属重要的球根花卉,在我国花卉产业中居于首要地位。我国百合野生资源丰富,但培育新品种方面与国外还有很大差距,每年需从国外进口大量种球以满足国内市场需
毛果杨(Popolus trichocarpa)具有基因组相对较小、染色体数目少、生长速度快、无性繁殖容易等特点,是第一个全基因组测序的木本植物,其遗传转化对木本植物功能基因组学的研
种质资源的鉴定与评价是对其有效利用的基础。从福建省南平、三明、龙岩、宁德和福州五个地区的17个县市,收集了大果油茶(Camellia chekiangoleosa)、普通油茶(Camellia olei
二化螟Chilo suppressalis Walker是我国主要水稻害虫之一,近年来发生量呈上升趋势。本文研究表明二化螟蚁螟在不同类型水稻品种上3d的存活率不同。在两优培九上,3d的存活率
生态公益林是改善和维护生态环境,保护生物多样性、保持生态平衡和保护国土安全等生态需求为主体功能的森林,处在生态区位重要的杉木人工林被划分为生态公益林经营,杉木(Cunn
4月26日,中国科协与国家知识产权局合作议定书签字仪式在中国科技会堂举行。中国科协党组书记申维辰代表中国科协,国家知识产权局党组书记、局长田力普代表国家知识产权局,签署《中国科学技术协会 国家知识产权局合作议定书》。议定书的签署,标志着两部门将在更大范围、更宽领域、更深层次上加强合作、优势互补,对于加快经济发展方式转变和建设创新型国家具有重大深远意义。中国科协党组成员、书记处书记张勤主持会议,中国
期刊
以人工饲料、转Bt水稻“克螟稻”(cry1Ab纯和基因型)及其对照亲本“秀水11”稻苗为供试寄主植物开展二化螟Chilo suppressalis(Walker)1~5龄幼虫的室内饲养试验,以明确不同龄