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CYP707A蛋白是高等植物内源ABA代谢主要途径的关键酶，属于细胞色素P450(CYP)单加氧酶超家族。水分胁迫下，CYP707A蛋白会被诱导表达，参与调控植物响应胁迫过程中内源ABA水平变化。植物体内ABA分布及水平对植物响应抗旱信号、提高抗旱能力的分子机制十分重要。ABA的分布及水平受合成、代谢以及运输的协同控制。前期研究已从花生中克隆得到AhNCED1，证明其具有NCED基因功能。干旱胁迫下，AhNCED1的水平与分布会影响ABA水平与分布。而花生植株ABA的代谢相关基因尚未有所研究。本论文研究花生在响应水分胁迫早期过程中AhCYP707A1蛋白表达以及与内源ABA分布的关系，旨在认识花生AhCYP707A1蛋白在花生响应干旱信号过程中调节ABA分布与水平的功能。主要研究结果如下: 1.从粤油7花生中克隆得到AhCYP707A1以及AhCYP707A2基因。生物信息学分析，AhCYP707A1以及AhCYP707A2与拟南芥以及菜豆的CYP707A蛋白具有较高的同源性，均含有高度保守的血红素铁配位体-半胱氨酸残基。 2.实时定量PCR分析AhCYP707A1以及AhCYP707A2基因表达。AhCYP707As在四叶期花生根茎叶中均有表达，其中在茎与叶表达最高。种子吸胀萌发时，AhCYP707A1表达急剧增加，AhCYP707A2检测不到表达。盐胁迫下，花生叶片AhCYP707As表达受到抑制。抗旱品种粤油7叶片响应水分胁迫后，AhCYP707As表达先下调再上升，敏旱品种汕油523叶片AhCYP707As表达受到抑制。不同抗旱花生品种叶片中AhCYP707A1表达量较AhCYP707A2高，并且表达变化也较大。 3.构建pPROEXHTa—AhCYP707A1原核表达载体，28℃下IPTG浓度1mM诱导融合蛋白表达，纯化pPROEXHTa—AhCYP707A1融合蛋白，高效液相色谱检测AhCYP707A1融合蛋白酶活，发现其能将ABA降解生成PA，具有ABA8-羟基化酶的降解活性，制备AhCYP707A1多克隆抗体，抗体与花生叶片提取蛋白有单一条带，条带大小符合预期蛋白大小。 4.花生叶片响应水分胁迫下AhCYP707A1蛋白表达先减少再增加，其中抗旱品种粤油7叶片AhCYP707A1蛋白表达量更多。免疫荧光定位检测花生叶片AhCYP707A1蛋白主要分布在叶片维管组织中。 5.花生叶片内源ABA含量的结果表明，水分胁迫下不同抗旱花生品种叶片ABA含量均呈上升趋势，其中抗旱品种粤油7ABA含量较高。用CYP707A蛋白抑制剂Diniconazole(DCN)处理，叶片ABA含量增加。免疫荧光定位检测结果发现，ABA主要分布在叶片维管组织中，100μmol/LDCN浸根处理后，花生叶片ABA分布增强。水分胁迫下花生叶片AhNCED1表达显著增加，抗旱品种粤油7叶片中AhNCED1表达量较汕油523高。 综上所述，本论文从粤油7花生叶片中克隆得到AhCYP707A1以及AhCYP707A2基因，花生不同组织、时期以及盐胁迫和水分胁迫下，CYP707As被诱导表达。水分胁迫初期，花生叶片AhCYP707A1蛋白表达均先被强烈抑制，促进ABA的积累，随后蛋白表达回升，参与ABA稳态调节。水分胁迫下，花生叶片AhCYP707A1蛋白以及ABA主要分布在叶片维管组织中。抗旱能力强的花生品种在水分胁迫下，ABA增加幅度大，AhNCED1的表达量较大，AhCYP707A1蛋白的表达以及分布均较强，表明抗旱品种花生ABA代谢更为活跃。