天府肉羊TNNT1、TNNT2和TNNI2基因的克隆以及组织表达

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangtang4211
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
骨骼肌占产肉动物躯体的40%,是动物躯体中最重要的组成部分,也是影响肌肉品质的重要因素之一,因而影响肉质生产的骨骼肌基因是家畜分子育种工作中重要的候选基因。肌钙蛋白12型(TNNI2)基因和肌钙蛋白T1 (TNNTl)作为快骨骼肌基因,在动物骨骼肌生长发育过程中起着重要的调控作用,是影响动物屠宰性能的重要功能基因:肌钙蛋白T2 (TNNT2)作为心肌亚型在影响心肌组织的正常活动方面具有很大的研究价值。本研究运用RT-PCR结合克隆测序方法分别获得了天府肉羊TNNT1、TNN12和TNNT2基因的全编码区序列。结果显示:TNNT1基因CDS区长度是759 bp,编码252个氨基酸,得到的蛋白序列含有一个保守结构域,7个磷酸化位点,且该蛋白质的二级结构只具有α-螺旋和无规则卷曲,没有延伸片段,提交NCBI获得登录号:KF939315; TNNT2基因具有较长的CDS区858 bp,编码285个氨基酸,蛋白序列含有15个磷酸化位点和一个保守结构域,蛋白二级结构主要为无规则卷曲和α-螺旋,提交NCBI得到登录号KF939316;克隆出天府肉羊的TNNI2基因,在NBCI数据库中blast,发现CDS区长度为549 bp,编码187个氨基酸。得到的该蛋白序列有1个保守结构域,存在6个磷酸化位点,蛋白质二级结构以无规则卷曲和a-螺旋为主,序列提交NCBI获得登录号:KF939314。对天府肉羊TNNT1氨基酸序列进行比对,结果显示天府肉羊与牛属、人属、海豚属、绵羊属、藏羚属、八齿鼠属、大熊猫属、猪属、羊驼属和猫属的相似性则分别为94%、92%、93%、72%、85%、91%、92%、93%、93%和91%,在TNNT1基因与其他物种的进化关系中,天府肉羊TNNT1基因与猪的关系最近,其次为绵羊、藏羚羊、八齿鼠和牛,家猫、雪貂和大熊猫分在一支,灵长类聚为一支;TNNT2氨基酸序列进行比对,结果显示天府肉羊与牛属、人属、水牛属、长臂猿属、犀牛属、犬属、熊猫属、猪属、雪貂属和猫属的相似性分别为94%、88%、95%、88%、89%、89%、89%、91%、88%和89%;在进化关系中天府肉羊TNNT2基因与反刍动物牛的关系最近,与人、黑猩猩和长臂猿等灵长类动物聚为一支,然后与雪貂和熊猫聚为一支,猪和小须鲸聚为一支,狼和海象聚为一支;TNNI2氨基酸序列与海象、猪、大鼠、家兔、小鼠、人、荷兰猪、牛、黑猩猩和海豚的相似性分别为97%、96%、96%、95%、94%、96%、94%、98%、92%和92%,构建TNN12氨基酸序列的系统发育树中,天府肉羊与牛的亲缘关系最近,其次为海象、人、猪与海豚的最远。实时荧光定量RT-PCR技术测定天府肉羊的TNNT1、TNNT2和TNNI2基因在11个组织中的相对表达量,结果表明:TNNTl基因在肺脏中表达量最高,在心脏中表达量最低;在4个年龄阶段中,365日龄肺脏中的表达量高于其他年龄段。TNNT2基因在心脏中高表达,其次为肝脏和肺脏,其他8个组织之间差异不显著;在心脏中,TNNT2基因表达量随日龄的增长而增加。TNNI2基因在被检测的11个组织中,以腹肌中的表达量最高,其次为膈肌,在内脏组织中表达量最低,检测的肌肉组织中的相对表达量与内脏组织的差异极显著(P<0.01);在1日龄、183日龄、365日龄和730日龄腹肌组织中,365日龄与其他日龄间的差异极显著(P<0.01)。蛋白质免疫印迹(Westren Bloting)分析TNNT1蛋白在天府肉羊365日龄龄时8个组织中的表达情况,结果显示,在8个组织中都检测到信号,其中除膈肌信号弱外,其他都比较强;在表达量上只有比目鱼肌与眼肌之间差异显著(P<0.05)外,其他各个组织之间比较都表现为差异极显著(P<0.01)。
其他文献
两次试验结果得出:日粮中锌含量在9.67mg/kg以下,即可引起肉仔鸡血清V和RBP浓度、肝脏和眼球ADH活性的显著下降.锌的缺乏程度不同,影响V代谢的机制也不完全相同.日粮锌含量为
中国房地产在经历了住宅项目开发热和商业地产项目开发热后,中国房地产进入了前所未有的发展领域,迎来了它的下一个投资热点--旅游地产旅游地产,顾名思义,就是以多种旅游项目为依
ABT生产粉是一项广普性根系生产促进剂,目前在果树、园艺和农业生产等方面已得到广泛应用,并产生了巨大的经济效益。1989年春起,黑龙江省望奎县开始试用ABT生根粉对水稻种籽
新时期,为了不断提高高职院校体育教学中人文素质教育水平,提高对体育人文精神的认识,本文通过实践研究,总结了高职院校体育教学中人文素质教育的有效措施,希望通过进一步研
10月1日晚,黔阳古城龙王庙码头灯火通明,热闹非凡,游客们兴致勃勃放“孔明灯”。这只是黔阳古城丰富多彩的国庆文化活动一个精彩缩影。  当日上午11时整,伴随着古城钟鼓楼上浑
我矿井下车间维修工人大搞技术革新,成功地自制一台U型矿车轮装卸拉力机,经过多次生产使用,效果良好,和原先用人工装卸矿车轮工作相比,提高工效八倍。以前,工人检修矿车轮时
9月12日至14日,为期三天的2013中国湖南(第四届)旅游产业博览会在长沙橘子洲景区民俗文化园举行。洪江市积极组织旅游景区和涉旅单位参加此次旅游产业盛会。此次旅游博览会以
9月23日,洪江市黔阳古城顺利通过了全国旅游景区质量等级评定委员会的评定,成为国家4A级旅游景区。黔阳古城是洪江市治所在地,具有2200多年建城历史。古城内九街十八巷纵横交
碗底是声音和权力的中心,不论场面多么盛大,只要把它们放进一个“碗”里,就变成一台可控的戏。对碗型的关注,后来造成了世界上最伟大的建筑发想之一。希腊圆形剧场一只巨碗,盛放得
1990年5月12日下午,我去无锡体育场拍摄市区第28届中学生田径运动会开幕式照片,任务是配发消息。下午2时,运动会举行入场式,60个方队分别表演了花圈舞、健美操、腰鼓,场面热