目的:筛选并鉴定鼻咽癌细胞中EZH2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)的相互作用蛋白,探讨EZH2在鼻咽癌形成与进展中的作用机制。方法:1.通过构建Flag-EZH2病毒表达质粒,利用慢病毒系统获得过表达Flag-EZH2的5-8F细胞系,并提取其细胞核蛋白。2.采用免疫共沉淀结合凝胶电泳分离EZH2相互作用蛋白,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术鉴定相互作用蛋白。3.选取RBMX和TF1蛋白,通过免疫共沉淀和Western Blot的方法再次验证与EZH2的相互作用。结果:1.构建Flag-EZH2病毒表达质粒,获得过表达EZH2的5-8F细胞系,提取了此细胞系的胞核蛋白。2.筛选出17中可能与EZH2相互作用的蛋白。3.验证RBMX蛋白与EZH2蛋白之间不存在相互作用,而TF1蛋白(本实验室自编代号蛋白)与EZH2蛋白之间存在相互作用。结论:1.本研究采用免疫共沉淀结合质谱分析在鼻咽癌细胞中鉴定了EZH2相互作用蛋白,为进一步研究EZH2蛋白的功能提供了实验依据。2.TF1蛋白与EZH2蛋白在鼻咽癌细胞中相互作用,可能与鼻咽癌的发生、发展存在重要的联系。