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铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall. ex Lindl)是我国传统名贵中药材,具有抗衰老和增强机体免疫力的作用。长期过度采挖致使铁皮石斛野生资源濒临枯竭,目前已成为国家二级珍稀濒危保护植物。铁皮石斛原球茎具有与原植物相似的生理生化代谢和形态发育潜能,因此,利用原球茎规模化培养作为野生铁皮石斛原植物的替代品,可能成为一条解决铁皮石斛资源短缺的有效途径。本研究以种子来源的铁皮石斛原球茎为原材料,通过比较液-固培养方式对原球茎生物量和多糖积累的影响,优化原球茎生长和多糖积累的培养工艺,然后研究了光强和钙离子等因素对原球茎培养的效果。主要结果如下：1.液体悬浮培养有利于原球茎的生长和多糖的积累,液体中原球茎增值系数是固体中的1.5倍,经过液体培养的原球茎仍能在固体培养基上正常的增殖和分化成石斛植株,无畸形苗的产生。2.以N6培养基为基本培养基,并附加1.0mg/LNAA+1.0mg/LKT+5%香蕉汁提取物+5%土豆汁提取物,接种量40g/L时最有利于原球茎生长和多糖的积累。3.在整个培养周期中,原球茎的生长曲线为“S”型,多糖含量呈现先减小后增加再减小的趋势,原球茎的鲜重在30d时达到122.9g/L,之后原球茎开始衰老,部分褐化死亡,多糖在25d时达到24.2%。4.光照强度过高和过低均不利于原球茎的生长,15001x的光照强度最为合适,此时原球茎的鲜重最高为120.75mg/L,多糖含量在25d最高为24.6%,可溶性蛋白含量15d最高为4.85mg/g,叶绿素含量和叶绿素a/b值一直维持正常水平。弱光下原球茎叶绿素含量降低,叶绿素a/b的值也较低,强光下培养后期原球茎叶绿素含量会迅速降低。5.3.0mmol/L的钙离子浓度下,原球茎鲜重最高为140.57g/L,具有最高含量的多糖25.9%和可溶性蛋白量5.31mg/g,并且此浓度也最有利于维持原球茎中的叶绿素含量。