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目的:本研究通过收集2018年1月-12月北京市昌平区昌平镇某哨点医院腹泻门诊病人腹泻粪便,对其进行常见的腹泻多病原检测,了解该院腹泻多病原感染状况;对检出的阳性病原菌进行毒力基因检测、耐药试验和脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE)分子分型,了解其腹泻病原菌的毒力基因分布情况、分子流行病特征及耐药特征,为制定当地感染性腹泻预防措施及临床合理用药提供可靠依据。方法:收集符合腹泻病例定义样本379份,对其进行致泻性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌、弯曲菌常见腹泻病原菌的筛查;随机法抽取120份腹泻标本,利用罗氏核酸试剂盒提取病毒核酸,对其进行A组轮状病毒、诺如病毒、肠道腺病毒和星状病毒检测。对阳性样本分离到的细菌采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)进行毒力基因检测;对检出的致泻性大肠埃希菌、沙门菌、副溶血性弧菌利用革兰氏阴性菌药敏检测板进行最低抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)测定、PFGE 分子分型。结果:379份腹泻粪便标本中检出腹泻病原菌68份,阳性率为17.94%,其中致泻性大肠埃希菌25株(6.59%),以肠致病性大肠埃希菌为主,共13株;副溶血性弧菌22株(5.80%),以O3:K6血清型为主,共12株,沙门菌19株(5.01%),以肠炎沙门菌为主,共11株;空肠弯曲菌和福氏志贺菌各检出1株(各0.26%)。120份腹泻样本中,病毒核酸阳性者40件,总检出率为33.33%,其中诺如病毒检出数最高,共23份(19.17%),且以诺如GⅡ型为主共18份;其次为A组轮状病毒10份(8.33%)和星状病毒7份(5.84%)。季节分布结果显示,细菌性腹泻在夏季发病率最高(63.60%),春季次之(25.80%);病毒性腹泻中在冬季发病率最高(34.80%),其次为春季(27.50%)。毒力基因检测结果显示,肠致病性大肠埃希菌毒力基因型别为eae+、bfp-,均为非典型肠致病性大肠埃希菌;肠聚集性大肠埃希菌,毒力基因型别均为agg R+、aafⅡ-;肠产毒性大肠埃希菌中,st的携带率为87.50%(7/8),lf携带率为50.00%(4/8)。副溶血性弧菌tdh毒力基因的携带率为86.36%(19/22),且毒力基因型均为tdh+、trh-,trh毒力基因携带率为4.54%(1/22),此菌株的毒力基因型别为tdh-、frh+,2株菌未携带trh和tdh毒力基因的,占比9.10%(2/22)。1株志贺菌携带ial、ipaH、sen、setl四种毒力基因。1株空肠弯曲菌同时携带CadF、flaA、cdtA、cdtB、cdtC 五种毒力基因。药敏试验结果显示,致泻性大肠埃希菌总耐药率为76.00%(19/25,耐药菌株数/菌株总数),对氨苄西林(AMP)的耐药率最高为52.00%,其次为萘啶酸(NAL)和复方新诺明(SXT),多重耐药株占比为42.10%(8/19);副溶血性弧菌总耐药率为81.80%(18/22),仅对头孢唑林一种抗菌药物产生耐药;沙门氏菌总耐药率为89.50%(17/19),对磺胺异恶唑(Sul)和萘啶酸(NAL)耐药率最高为68.40%,其次为氨苄西林(AMP)耐药率为47.40%,多重耐药株占比为 52.94%(9/17)。PFGE聚类结果显示,致泻性大肠埃希菌中,4株肠聚集性大肠埃希菌共产生4种PFGE带型,相似系数为62.4%～82.9%;13株肠致病性大肠埃希菌产生13种带型,基因指纹图谱相似系数为50.1%～78.1%;8株肠产毒性大肠埃希菌产生6种条带(其中cp2018DE05和cp2018DE18两株菌带型一致,cp2018DE22和cp2018DE24两株菌带型一致)各带型间相似系数为63.7～100%。副溶血性弧菌共产生15种带型,基因指纹图谱相似系数为60.4%～100%;优势血清型O3:K6型菌株聚为一簇,O4血清群菌株聚为一簇,两株O2血清群菌株也聚为一小簇。沙门菌产生13种带型,相似系数为44.8%～100%;其中优势血清型肠炎沙门菌聚为一大簇,2株斯坦利沙门菌为相同带型,2株伦敦沙门菌为相同带型。结论:1.腹泻多病原流行病学特征:该院2018年常见腹泻病原菌感染包括致泻性大肠埃希菌、副溶血性弧菌、沙门菌、福氏志贺菌和空肠弯曲菌;病毒性腹泻感染包括诺如病毒、A组轮状病毒及星状病毒;病原检测分布无性别及年龄差异,但存在季节性差异。2.腹泻病原菌病原学特征:肠致病性大肠埃希菌均为非典型肠致病性大肠埃希菌,肠聚集性大肠埃希菌均未携带aafⅡ毒力基因,肠产毒性大肠埃希菌以携带st毒力基因为主;副溶血性弧菌以携带tdh毒力基因为主。3.腹泻病原菌耐药性:致泻性大肠埃希菌和沙门氏菌耐药谱广泛。副溶血性弧菌耐药谱单一,大部分菌株仅对头孢唑林耐药。4.PFGE分子分型特征:致泻性大肠埃希菌、沙门菌、副溶血性弧菌PFGE带型呈多态性。