比率荧光测定技术是基于两个或两个以上荧光信号变化而建立的分析方法,具有分析灵敏度高、抗干扰能力强等优点,在小分子检测、细胞成像、活体诊断等领域受到研究者的广泛关注。发展基于纳米材料的比率型荧光探针是当前研究的热点之一。鉴于此,本论文在合成氮掺杂碳点（CDs）的基础上,构建了一种基于CDs检测Fe³⁺的新型比率型荧光探针;利用实验室制备的金簇（Au NCs）,构建了一种基于Au NCs的比率型pH荧光探针,具体研究工作如下:1.以抗坏血酸和聚乙二醇二胺为原料,合成了稳定性好、量子产率高的氮掺杂CDs,采用透射电子显微镜（TEM）,紫外-可见（UV-Vis）吸收光谱,荧光光谱（FL）及傅里叶变换红外光谱（FT-IR）等对制备的CDs进行表征,将罗丹明B异硫氰酸酯（RhB）偶联到CDs表面,构建了一种检测Fe³⁺的比率型探针（CD-RhB）。结果表明,当溶液中Fe³⁺浓度在0.01-1.2μmol/L范围内时,探针在波长为399 nm和577 nm的光强度比值与Fe³⁺浓度具有良好的线性关系,线性方程为:I399（CDs）/I577（RhB）=0.256+0.379 C（C:μmol/L）,线性系数R2为0.996,检测限为6 nmol/L。在此基础上,探讨了探针检测Fe³⁺的作用机理为FePO4沉积在碳点表面,导致CDs的表面钝化和颗粒增大,使得CDs的FL和散射光（LS）强度逐渐增大而RhB的FL基本不变化。此外,将此比率型荧光探针用于实际水样中Fe³⁺的测定,回收率在97.2%-108.8%之间,表现出良好的实用性。2.参考文献制备了以牛血清白蛋白（BSA）为修饰剂的金簇（BSA-Au NCs）,将BSA-Au NCs与荧光素异硫氰酸酯（FITC）偶联,构建了一种选择性和特异性均良好的比率型pH探针,采用聚乙烯亚胺（PEI）包裹制备一个纳米微球BAF@PEI。对纳米微球进行TEM,UV-Vis,FL,FT-IR等一系列表征。结果表明,BAF@PEI的粒径为60 nm左右,以365 nm为激发波长,发射波长在522 nm和604 nm处出现FITC和BSA-Au NCs对应的荧光峰。在pH 4.0-10.0范围内,随着pH的增加,BSA-AuNCs的荧光强度基本保持不变,FITC的荧光逐渐增强。纳米微球在pH 5.0和pH 9.0之间表现出良好的可逆性。MTT实验表明BAF@PEI的细胞毒性低,有望进一步用于生物标记和成像。