论文部分内容阅读
理想的根管充填材料应该具有易操作、X线阻射、体积稳定、不易被吸收、能黏附于牙本质、封闭性.好、无毒、生物相容性好和骨诱导等特点。由于根管充填材料。_.与根尖周组织可发生物理性接触,根尖周组织和细胞对材料反应可影响根管治疗的成败,所以材料具有良好的生物相容性和根尖封闭能力是临床选择根管充填材料的重要依据。目前临床上常用的根管封闭材料有氧化锌类、环氧树脂类等,但是还没有一种材料能满足理想材料的要求。iRoot SP根管封闭剂是最近上市的一种可注射、即刻应用的钙硅基根管封闭材料。它不溶于水,不含铝,需水凝固和硬化。与MTA的成分类似,它主要由硅酸钙,磷酸钙,氧化锆,氢氧化钙等成分组成。但作为一种具有较好临床应用前景的新材料,目前对iRoot SP生物相容性、骨诱导能力和封闭性能的研究尚较少。本研究将i Root SP根管封闭剂与国内外临床常用的AH Plus封闭剂、MTA材料的生物相容性、根尖封闭能力作对比研究。评价新型根管封闭剂iRoot SP对大鼠皮下组织、骨组织和L929细胞的生物相容性、并探讨其对MG63细胞矿化基因表达的影响,同时体外检测iRoot SP根管封闭剂的根尖封闭能力。第一部分iRoot SP对大鼠皮下和骨组织相容性的研究目的：比较i Root SP、MTA和AH Plus材料对大鼠皮下和骨组织的生物相容性。方法：按不同实验分别选用选体重约200g健康、卫生情况良好的雄性Wistar大白鼠28只,将iRoot SP.MTA或AH Plus材料埋植在大鼠皮下与胫骨内。按1、2、4和8周时间段,观察不同材料对大鼠皮下组织的相容性；按2、4、8和12周时间段,比较不同材料对大鼠胫骨组织的相容性,结果：皮下埋植实验显示：1、2周时,iRoot SP.MTA.AH Plus和对照组的炎症反应程度均为中度,各组差异无统计学意义(P>0.05)。4周时,各实验组炎症反应程度较1、2周时低,其中AH Plus组炎症反应程度在此期相对较为严重,表现为中度炎症反应,形成厚的纤维包膜；jRoot SP组、MTA组和对‘照组炎症反应轻微,与AH Plus组相比有显著性差异(P<0.05)。8周时,iRoot SP组、MTA组、AH Plus组和对照组炎症反应轻微,各组无显著性差异(P>0.05),但AH Plus组形成的纤维包膜较厚。骨内埋植实验显示：iRoot SP组：随着时间的增加,材料边缘区逐渐形成成熟的骨小梁,并沿孔隙向材料内部生长,材料表面可见新骨覆盖。AH Plus组：2、4周时,可见材料与周边骨界面区域结合欠紧密,未见到明显的细胞分化,表现为中度炎症反应；8、12周时,材料边缘成骨活跃,边缘区域有纤维组织与材料直接结合,材料内部未见新生骨。MTA组：材料边缘区逐渐形成成熟的骨小梁,周边的新骨组织成骨活跃,并逐渐增多,逐渐成熟,材料内部未见新生骨。对照组：新生骨组织不规则的分布于骨缺损中,逐渐长入中央区并随时间呈递增趋势。结论：iRoot SP与MTA材料对大鼠皮下和骨组织具有较好的生物相容性,并具有一定的骨诱导性。第二部分iRoot SP对L929细胞的生物相容性研究目的：检测iRoot SP. MTA和AH Plus三种根管充填材料对L929细胞的的非特异性细胞毒性,比较三种材料对L929细胞的生物相容性。方法：本试验采用分_,滤过法检测iRoot SP、MTA和AH Plus三种根管充填材料在未硬固和硬固状态下对L929细胞的细胞毒性。采用MTT法检测iRoot SP.MTA和AH Plus三种根管充填材料浸出液对L929细胞的非特异性细胞毒性。结果：分子滤过实验结果显示未硬固的iRoot SP材料有轻度细胞毒性,但硬固后无细胞毒性；新混合的AH Plus材料有中度细胞毒性,24小时硬固后有轻度细胞毒性；新混合与硬固后的MTA无细胞毒性。MTT实验结果显示iRoot SP与MTA材料浸提液无细胞毒性,而AH Plus的浸提液有轻度细胞毒性。结论：未硬固的iRoot SP材料有轻度细胞毒性,但硬固后无细胞毒性。iRoot SP与MTA材料对L929细胞生物相容性较好。第三部分iRoot SP对MG63细胞矿化基因表达的影响目的：检测iRoot SP对MG63细胞的细胞毒性和对MG63细胞矿化基因表达的影响,探讨iRoot SP影响细胞矿化的机制。方法：制备不同浓度的iRoot SP和AH Plus样本浸出液,用MTT法和矿化实验检测不同样本浸出液对MG63细胞的非特异细胞毒性与促矿化能力。并将iRootSP和AH Plus样本浸出液与MG63细胞共同培养1、3、6天,利用RealTime PCR检测MG63细胞外基质矿化相关基因COLI、BSP和OPN的mRNA表达,ELISA检测细胞上清液中COL I与BSP蛋白表达变化,比较同一基因与蛋白在不同培养阶段的表达变化。结果：MTT实验结果显示未稀释的iRoot SP浸出液对MG63细胞无毒性,未稀释的AH Plus浸出液有轻度细胞毒性。iRoot SP与AH Plus相比,能上调MG63细胞矿化基因COLI、OCN和BSP第3天和6天的mRNA表达,并增加了COLⅠ和BSP蛋白第6天的表达。结论：iRoot SP是能够诱导MG63细胞矿化反应的生物相容性材料。第四部分iRoot SP根尖封闭性能的体外研究目的：体外评价iRoot SP根管封闭剂的根尖封闭能力。方法：离体单根管恒牙68颗,随机分为3组,每组20颗；第一组用iRoot SP与热牙胶连续波充填技术；第二组用iRoot SP与单尖法；第三组用AH Plus与连续波允填技术充填根管。通过液体转移实验比较三组根管在24小时、1周、4周和8周后的根尖封闭能力,并通过扫描电镜观察根管壁与糊剂之间的结合特征结果：三组的微渗漏值无统计学差异。扫描电镜下不同根管封闭剂与根管壁和牙胶间均观察到空隙存在。结论：iRoot SP与AH Plus的根管封闭性能无统计学差异。