凡纳滨对虾对四种必需氨基酸需要量及低蛋白饲料研究

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本论文主要研究凡纳滨对虾对四种必需氨基酸(赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和精氨酸)的需要量,对不同饲料级赖氨酸源和蛋氨酸源的利用效率,和对低蛋白、低鱼粉饲料的使用效果。该论文包括六个方面的内容: 1.采用56天的生长实验研究了凡纳滨对虾(0.48±0.01g)在低盐度(0.50-2.00gL-1)下的苏氨酸需要量。以鱼粉和小麦面筋蛋白为蛋白源,使用L—晶体氨基酸(以羧甲基纤维素预包被),模拟凡纳滨对虾组织的氨基酸组成,配制含粗蛋白质3609kg-1、总能为19.5MJ/kg的七种等氮等能实验饲料,其中饲料1-6分别添加L—苏氨酸配成9.9-19.0gkg-1(以干物质计)6个水平的苏氨酸饲料,饲料7为参考饲料,以鱼粉和小麦面筋蛋白作为蛋白源。实验每组设三个重复,每个重复30尾虾,采用饱食投喂,每天饲喂4次。结果发现:饲喂最低水平苏氨酸饲料组除成活率和生长缓慢外,未发现其它营养性缺乏症状;饲喂参考饲料组与苏氨酸水平高于13.3gkg-1各组相比,增重率、特定生长率、饲料利用率、全虾和肌肉的蛋白质及脂肪含量没有差异;最佳的增重、特定生长率和蛋白利用效率出现在饲喂14.6gkg-1苏氨酸饲料组,提高饲料的苏氨酸水平并未发现更好的生长性能;苏氨酸水平显著影响了体组成成分、血淋巴的甘油三酯和总蛋白含量(p<0.05),但未明显影响肌肉的苏氨酸含量、血淋巴中天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶的活性。以特定生长率为指标,根据折线回归模型得到凡纳滨对虾的最适苏氨酸需要量为饲料的13.6gkg-1(占饲料蛋白质的3.78%)。 2.在低盐度下(0.50-1.50gL-1)饲养凡纳滨对虾(初始体重为0.479±0.01g)8周,以确定凡纳滨对虾对精氨酸的需要量。使用鱼粉和小麦面筋蛋白作为完整蛋白源配制6种等氮等能的半纯合饲料(粗蛋白水平为360gkg-1,总能为19.70MJkg-1),饲料中添加预包被的晶体氨基酸配制6个精氨酸水平13.9-28.6gkg-1(以干物质计)。实验每组设3个重复,每个重复30尾虾,每天饲喂4次。结果表明,饲喂最低水平精氨酸饲料组的生长性能和饲料利用率最低:饲喂22.6gkg-1精氨酸组的增重率最大,但进一步提高饲料精氨酸水平并未发现更好的生长性能。饲料中精氨酸水平显著影响了凡纳滨对虾全虾和肌肉的组成成分、肌肉的精氨酸含量和血淋巴中甘油三酯、总蛋白和尿素的水平(P<0.05)。但是血淋巴中天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶未受饲料中精氦酸水平的影响(P>0.05)。以增重率为指标,根据折线回归模型可知,凡纳滨对虾的最适精氨酸需要量为饲料的20.8gkg-1(占饲料蛋白质的5.78%)。 3.在以鱼粉、小麦面筋蛋白和氨基酸混合物为蛋白源的饲料中添加不同水平的蛋氨酸,实验分6个处理组(粗蛋白含量为360gkg-1、总能为19.90MJkg-1),饲料中蛋氨酸水平分别为6.2、6.6、8.4、9.5、10.5和12.7gkg-1,实验虾初始重为0.47±0.01g,在盐度为0.50-1.50gL-1下进行为期8周的生长实验。结果表明,饲料中蛋氨酸水平为9.5gkg-1组的增重率、特定生长率和蛋白质效率最高,降低或是提高饲料的蛋氨酸水平,凡纳滨对虾的增重率、特定生长率和蛋白质效率反而出现显著或是不显著的不同程度降低;饲料系数则随着饲料中蛋氨酸水平由6.2gkg-1增加到8.4gkg-1而显著降低,蛋氨酸水平进一步提高,饲料系数出现提高趋势。饲料中蛋氨酸水平对成活率没有显著影响。凡纳滨对虾的全虾和肌肉中的粗蛋白质随饲料蛋氨酸水平的增加而上升,并在10.5gkg-1时达到最高,进一步提高饲料蛋氨酸水平则有下降趋势;全虾的水分含量以及全虾和肌肉的粗脂肪含量不受饲料中蛋氨酸水平影响。饲料中蛋氨酸水平对凡纳滨对虾血淋巴的总蛋白、尿素、甘油三酯、天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶有显著影响。分别以特定生长率和饲料系数为指标,根据折线模型估测凡纳滨对虾对蛋氨酸的适宜需要量分别为9.09和9.06gkg-1干物质(占饲料蛋白质的2.52%)。 4.本研究目的是在低盐度下(0.50-1.50gL-1)确定凡纳滨对虾的赖氨酸需要量。以鱼粉和小麦面筋蛋白作为完整蛋白源,添加预包被的晶体氨基酸配制6种等氮等能的实验饲料(粗蛋白含量为360gkg-1、总能为19.70MJkg-1),饲料中的L—赖氨酸水平从12.5gkg-1以3gkg-1的梯度逐步上升到26.4gkg-1。实验每组设3个重复,每个重复30尾虾(初始体重为0.48g±0.01g),每天饲喂4次,实验为期6周。结果表明,饲料中赖氨酸水平显著影响了凡纳滨对虾的生长、饲料系数和蛋白质效率。当饲料中赖氨酸水平从12.5gkg-1提高到20.6gkg-1,凡纳滨对虾的增重率和特定生长率随饲料赖氨酸水平升高而升高(P<0.05),当饲料赖氨酸水平高于20.6gkg-1时各组增重率和特定生长率没有显著差异(P>0.05)。赖氨酸水平最低组对虾的饲料效率和蛋白质效率最差(P<0.05)。成活率不受饲料中赖氨酸水平的影响(P>0.05)。以增重率为因变量,根据二次曲线回归方程,凡纳滨对虾对赖氨酸的需要量占饲料于重的23.15gkg-1,即占饲料蛋白质的6.43%。 5.通过两个为期50天的生长实验研究在凡纳滨对虾实用饲料中补充不同蛋氨酸源和不同赖氨酸源对其生长性能、机体和肌肉组成以及形体指标的影响,以评估凡纳滨对虾对不同蛋氨酸源和赖氨酸源的利用效率。 实验一,使用商品凡纳滨对虾饲料常用的原料配制缺乏蛋氨酸的基础饲料(蛋氨酸水平为6.2gkg-1,粗蛋白质水平为360gkg-1),在基础饲料中分别添加L—蛋氨酸、DL—蛋氨酸和DL—羟基蛋氨酸以达到凡纳滨对虾的蛋氨酸需要量(9.0gkg-1左右)。实验每组设3个重复,每个重复30尾虾(初始体重为0.99±0.02g),每天饲喂3次。结论:在缺乏蛋氨酸的凡纳滨对虾饲料中以低剂量补充不同商品蛋氨酸源对生长性能和全虾粗蛋白含量都有改善,但不同蛋氨酸源之间没有差异。 实验二,使用商品凡纳滨对虾饲料常用的原料配制缺乏赖氨酸的基础饲料(赖氨酸水平为17.6gkg-1,粗蛋白质水平为360gkg-1),在基础饲料中分别添加L—盐酸赖氨酸盐和L—硫酸赖氨酸盐以达到凡纳滨对虾的赖氨酸需要量(22.3gkg-1左右)。实验每组设3个重复,每个重复30尾虾(初始体重为0.98±0.02g),每天饲喂3次。结论:在缺乏赖氨酸的凡纳滨对虾饲料中以低剂量添加不同商品赖氨酸源对生长都有所改善,但是添加L—赖氨酸硫酸盐的效果优于L—赖氨酸盐酸盐,可显著提高凡纳滨对虾的生长。 6.本研究通过两个生长实验评价了补充商品合成氨基酸降低凡纳滨对虾实用饲料的蛋白质水平和鱼粉用量对其生长性能、体组成和表观消化率的影响。 实验一,设计四种饲料,饲料1为对照,使用220gkg-1鱼粉,粗蛋白质水平为412.6gkg-1,通过调整配方中鱼粉、豆粕和面粉含量,将饲料2-4的粗蛋白质水平分别配制为398.1、384.0和355.2gkg-1,并且通过补充合成氨基酸将饲料2-4的赖氨酸、含硫氨酸和苏氨酸水平与饲料1保持一致。实验使用320尾虾(0.36±0.01g)随机分为4组,每组四个重复,各组虾分别饲喂相应的饲料至表观饱食,每天分三次饲喂,在盐度为31.2-32.7gL-1下进行为期70天的实验。研究发现:将饲料的蛋白质水平从412.6gkg-1降至355.2gkg-1对凡纳滨对虾的增重率、特定生长率、饲料利用率和蛋白质效率没有影响,但饲喂饲料4组的成活率显著低于其它各组(p<0.05);未观察到各组的体蛋白质含量、体脂肪含量以及表观消化率的差异。本研究结果表明:在凡纳滨对虾实用饲料中补充相应的合成氨基酸能够将饲料的粗蛋白质水平从412.6gkg-1降至355.2gkg-1而不影响其生长、体组成和表观消化率。 实验二,设计六种饲料,饲料1为对照,使用240gkg-1鱼粉,粗蛋白质水平为363.3gkg-1,通过调整配方中鱼粉、豆粕和面粉含量,将饲料2-6的粗蛋白质水平分别配制为353.2、341.2、328.3、315.5和304.1gkg-1,并且通过补充合成氨基酸将饲料2-6的赖氨酸、含硫氨酸、精氨酸和苏氨酸水平与饲料1保持一致。实验每组3个重复,每个重复30尾虾(0.99±0.02g),每天分三次饲喂,在盐度为7.0-8.0gL-1下进行为期50天的实验。研究发现:将饲料的蛋白质水平从363.3gkg-1降至328.3gkg-1对凡纳滨对虾的增重率、特定生长率、饲料利用率、蛋白质效率和成活率没有显著影响(p<0.05);进一步降低饲料的蛋白质水平至315.5gkg-1和304.1gkg-1,对虾的生长、摄食量和成活率出现显著下降(P<0.05)。饲料的蛋白质水平和鱼粉含量并未影响对虾的饲料转化率。未观察到各组全虾和肌肉的组成、肝体比和表观消化率的差异(P<0.05)。总氨氮量随饲料蛋白质水平的降低明显下降(P<0.05),饲喂饲料1组总氨氮排出量最高,显著高于其它处理组(P<0.05)。 结论:通过补充合成氨基酸保证凡纳滨对虾饲料主要限制性必需氨基酸一致下,将蛋白质水平从363.3gkg-1降至328.3gkg-1和鱼粉的用量降低25%不影响凡纳滨对虾的生长性能、表观消化率和体组成,但明显降低了水中总氨氮浓度,改善饲养环境。
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