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S-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(EthylS-4-chloro-3-hydroxybutyrate，(S)-CHBE）和R-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(EthylR-4-chloro-3-hydroxybutyrate，(R)-CHBE）是合成许多重要药物的关键光学活性中间体，具有重要的应用价值。当前两种手性醇的生产方式依然有待改进，因此，开发一种高效、环境友好生物催化的生产方法，是近年来的研究热点。 本文首先以近平滑假丝酵母为生物催化剂，探究在不同的催化条件下全细胞催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((S)-CHBE)的催化效果。实验证明，反应底物转化率可达83.7％，S型产物e.e.(S)值可达88.9％。辅助底物葡萄糖为0.2g/mL，Zn2+浓度为2mM时，细胞活性达到最高。为减轻底物和产物抑制的作用，研究了近平滑假丝酵母在两相体系中不对称还原反应，结果表明，水/正己烷两相体系中，底物转化率为97.07％，S型产物e.e.(S)值为84.96％。 以近平滑假丝酵母总DNA模板，通过PCR反转录技术扩增出近平滑假丝酵母羰基还原酶基因(rCR)，构建了重组大肠杆菌E.coliJM109/pET32a-rCR;在摇瓶条件下，将重组菌E.coliJM109/pET32a-rCR作为催化剂，不对称还原4-氯代乙酰乙酸乙酯(COBE)为R-(+)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)，在pH6，温度32℃，底物浓度0.05mol/L，水/乙酸乙酯两相体系的反应条件下，反应底物转化率为76.5％，R型产物光学e.e.(R）值＞99％。 最后，为了解决辅酶再生问题，构建辅酶微电极，实验对NADPH在CNT/GC电极上的电催化氧化进行研究，实验表明，扫速为50mV/s时，氧化峰电位为+0.9V。将CNT/GC电极与重组菌转化实验相结合，结果表明，底物转化率比重组菌转化率提高了10.1％，R型产物光学e.e.(R）值＞99％。