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目的:检测人正常与退变椎间盘髓核组织中microRNA(miRNA)及蛋白水解酶的表达水平,并通过生物信息预测的方法,找到两者之间的对应关系,探讨其对椎间盘退变的影响。为深入探索microRNA在人退变椎间盘中调控相应蛋白水解酶的作用提供前期理论支持。方法:①对照组(Normal):正常椎间盘髓核组织,取自2013年4月至2013年11月因外伤性脊柱骨折于苏州大学附属第二医院脊柱外科住院的手术患者,共5例(男3例,女2例),平均年龄40.60(30~50)岁。②实验组(IVDD):退变椎间盘髓核组织,取自同期因腰椎间盘突出症于苏州大学附属第二医院脊柱外科住院的手术患者。共20例(男10例,女10例),平均年龄45.20(16~65)岁。对所有取到的标本我们常规制作石蜡切片,使用HE染色对两组标本进行组织形态学观察和病理学判断;通过生物信息预测的方法预测所要检测的microRNA的靶基因—蛋白水解酶基因,进而使用实时荧光定量PCR方法检测两组髓核组织中microRNA及相应的蛋白水解酶基因的表达水平。结果:1.脊柱骨折患者髓核组织切片HE染色表现为细胞数目多,细胞体积较小,呈类圆形,形似软骨细胞,位于软骨陷窝内,散在分布于细胞外基质中并被其包绕,并可见少数的细胞团,胶原纤维有序排列于类软骨细胞周围形成规整网状结构;腰椎间盘突出症患者髓核组织主要表现为细胞数目减少,胞质空泡样变性,细胞溶解,影像不清晰,凋亡细胞数目增多,并出现细胞聚集现象,周围胶原纤维排列紊乱,其间出现裂隙。HE染色切片显示,所取脊柱骨折患者髓核组织均为正常髓核组织,无明显退变发生;所取腰椎间盘突出症患者髓核组织均符合椎间盘退变的病理形态学改变。2.RT-PCR各项检测结果以均数±标准差表示,计量资料比较采用t检验分析证实,当P<0.05时组间差异有统计学意义。生物信息预测发现人类miR-663b,miR-625-5p的靶基因分别为MMP-2,ADAMTS-4的mRNA,而miR-623的靶基因同时为MMP-3和MMP-13的mRNA。RT-PCR结果显示,在退变椎间盘髓核组织中,miR-663b表达水平明显降低,而miR-625-5p及miR-623在两组标本中的变化无统计学意义;但在退变髓核组织中,蛋白水解酶MMP-2,ADAMTS-4,MMP-3,MMP-13的mRNA表达水平明显升高,具有统计学意义。结论:在退变椎间盘中,蛋白水解酶MMP-2,ADAMTS-4,MMP-3,MMP-13的基因表达水平明显升高,表明其参与退变椎间盘细胞外基质的降解过程,最终导致椎间盘退变;miR-663b在退变椎间盘中表达明显下降,并且与蛋白水解酶MMP-2基因具有相对应的关系,表明可能由于miR-663b的表达下降,其抑制MMP-2的能力降低,从而引起MMP-2的基因表达量上调。通过对退变椎间盘髓核组织内microRNA及多种蛋白水解酶的检测,为以后进一步探索两者之间的调控机制提供了理论基础。