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目的:人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)是引起全世界婴幼儿严重急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI)的最重要病毒性病原体之一。对2017年12月～2018年3月贵州地区婴幼儿呼吸道合胞病毒进行分离培养与基因变异分析,可以掌握贵州地区HRSV的分子流行病学特征,并对其临床特征进行分析,判断基因型与临床特征及病情的是否相关,对贵州地区HRSV引起的呼吸道感染的预防控制提供重要依据。方法:收集贵州省某三甲医院2017年12月至2018年3月收治的急性呼吸道感染患者的鼻咽分泌物。将鼻咽分泌物标本接种到Hep-2细胞中,分离出HRSV。采用间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)和逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase,RT-PCR)对出现细胞病变(cytopathic effect,CPE)的样本进一步验证,并将PCR产物测序。对贵州地区HRSV分离株进行核苷酸和氨基酸序列分析,基因分型,并进行系统发育分析。应用SPSS22.0数据分析软件,对HRSV A亚型和B亚型的基因型临床特征进行分析。结果:2017年10月至2018年3月共收集到196例鼻咽分泌物标本,分离出39株病毒,经IFA和RT-PCR鉴定为HRSV。对HRSV G蛋白C末端第二高变区(the second hypervariable region,HVR2)进行序列分析,表明贵州地区HRSV感染中,79%的HRSV分离株属于A亚型的ON1基因型,21%属于B亚型的BA9基因型。贵州地区HRSV A亚型分离株与A亚型标准株A2之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为86.1%～87.9%和79.6%～81.6%,而贵州地区HRSV B亚型分离株与B亚型标准株CH18537之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为76.9%～83.8%和61.1%～70.1%。所有A亚型均出现24个氨基酸序列的插入,氨基酸长度为321aa,所有B亚型均出现20个氨基酸的插入,氨基酸长度为312aa。临床初步分析表明,HRSV阳性检出率与患儿年龄性别无统计学意义,且不同亚型与患儿临床症状以及感染致患儿重症肺炎的比率差别均无统计学意义。结论:首次系统进行了贵州地区HRSV的分离与基因变异分析。贵州地区在2017年12月至2018年3月,HRSV感染病例以A亚型感染为主,B亚型共同传播,A亚型的优势基因型为ON1基因型,B亚型的优势基因型为BA9基因型。