背景及目的:类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一种慢性自身免疫性疾病,最终会导致关节畸形和功能丧失,危及人类健康。其特点是滑膜增生,血管翳形成,造成软骨破坏和骨侵蚀。RA的确切机制尚未完全阐明,许多细胞因子及炎性细胞参与其中。目前,治疗RA的临床药物主要为改善病情抗风湿病药物（Disease modifying anti-rheumatic drugs,DMARDs）,生物制剂等。但这些用药伴随着严重的不良反应,如骨质疏松、肝功能损害、甚至增加发展为淋巴瘤的风险。仅仅只阻断某一种或者两种细胞因子,对于延缓疾病的进程,改善患者的生活质量远远不够。因此,研究出新颖又广谱的抗炎治疗方案显得尤为紧迫和重要。PD-1是激活的T细胞或者效应T细胞上表达的负调控因子,相关研究提示PD-1/PD-L1可能是RA中的治疗新靶点。如今细胞膜囊泡,如巨噬细胞、中性粒细胞、脐静脉内皮细胞等来源的膜囊泡已用于RA的相关研究,在模型小鼠上验证治疗方案的可行。本课题聚焦于炎性关节大量增殖的滑膜成纤维细胞,刺激其高表达PD-L1后制备成细胞膜囊泡,并装载纳米颗粒,可利用其同源靶向性及纳米颗粒本身所具有的特性,靶向受累关节,打开PD-1/PD-L1通路的免疫检查点“开关”,抵消免疫刺激信号,限制PD-1+效应细胞启动自身免疫破坏,从而提供一种新颖且有效的治疗方法。方法:用雷帕霉素（Rapamycin,RAPA）和（或）IFN-γ体外刺激小鼠滑膜成纤维细胞（Murinesynovial fibroblast,MSF）,将 rapamycin 和（或）IFN-γ 刺激的MSF与T细胞共培养,比较对T细胞增殖分化的影响;并制备其细胞膜囊泡,与T细胞共培养,比较T细胞增殖分化的影响;构建胶原诱导关节炎（Collagen-induced arthritis,CIA）小鼠模型,评价不同膜囊泡的治疗效果。实时荧光定量PCR从转录水平比较三组间PD-L1等免疫检查点分子、胶原、炎性因子等的相对表达量;Western cblot及流式细胞术从蛋白水平比较PD-L1等免疫检查点分子的表达情况。收集并分析RA与骨性关节炎（Osteoarthritis,OA）患者的外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）以及关节滑液单个核细胞（Synovial fluid mononuclear cell,SFMC）中,验证 PD-1+T 细胞亚群数量是否增加;结果:rapamycin和IFN-γ共同刺激的MSF及其细胞膜囊泡与T细胞共培养可更显著地抑制其增殖及分泌功能;合成膜囊泡包纳米颗粒,在CIA模型上可靶向至受累关节,并显著降低关节炎的临床评分及影像学评分。流式及western blot从蛋白水平验证rapamycin和IFN-γ共同刺激MSF,主要是PD-L1表达明显上调,转录水平上同样验证CD274相对表达量明显增加;RA患者相较于OA患者的SFMC中,CD4+PD1+T细胞占比明显增加。结论:Rapamycin和IFN-γ刺激后的滑膜成纤维细胞及其膜囊泡可显著抑制T细胞的增殖及活化,体内验证制备的细胞膜囊泡可靶向治疗RA。潜在的作用机制可能是rapamycin显著增加IFN-γ上调滑膜成纤维细胞PD-L1表达的能力,从临床样本分析出CD4+PD1+T细胞在RA患者的SFMC中比例显著增加,进一步验证了该机制,本研究为RA进一步的研究及治疗提供潜在的新方向。