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根结线虫（Meloidogyne spp.）是一类非常重要的植物病原线虫,给农业生产造成了巨大经济损失。根结线虫二龄幼虫侵入到寄主植株根系,食道腺分泌物经由口针注入植物细胞中,从而刺激寄主植物根部形成巨型细胞并产生根结。根结线虫食道腺蛋白在线虫与寄主植物蛋白的相互作用过程中发挥着关键作用。在根结线虫刚开始产卵时,巨型细胞逐渐出现空泡化,内含物大幅减少,由此推测根结线虫食道腺分泌蛋白启动了寄主植物的自主凋亡信号转导途径。本研究以南方根结线虫中编码程序性死亡蛋白6（Programmed cell death protein 6,PDCD6）基因和与之互作的番茄根组织MYB相关蛋白330（Myb-related protein 330-like）基因为研究对象,用双分子荧光互补（bimolecular fluorescence complementation,BiFC）技术研究了MiPDCD6蛋白和LeMYB330蛋白的相互作用及其互作位点,并对VIGS番茄组培苗的沉默效应进行了研究,为揭示南方根结线虫调控其寄主巨型细胞空泡化的分子机理和抗根结线虫育种奠定了良好的基础。本研究主要取得如下创新性结果:1、明确了LeMYB330与MiPDCD6基因的亚细胞定位。用基因枪轰击的方法,对LeMYB330与MiPDC D6表达部位进行定位实验,将构建好的GFP-PDCD6重组载体和GFP-MYB330重组载体,分别轰击至洋葱表皮细胞,25℃培养24h后,在487nm绿色激发光,10×荧光显微镜下LeMYB330蛋白在细胞核中检测到较为明显的绿色荧光信号,表明该蛋白的表达部位是细胞核;MiPDCD6蛋白在细胞质和细胞核内均检测到较为明显的绿色荧光信号,表明MiPDCD6蛋白的表达部位是细胞质和细胞核。2、用BiFC技术证明了LeMYB330与MiPDC D6蛋白的相互作用。将构建好的pUC19-PDCD6重组载体和pUC19-MYB330重组载体,共同轰击至洋葱表皮细胞,25℃培养24h后,487nm绿色激发光,在10×荧光显微镜下LeMYB330和MiPDCD6蛋白在细胞核内检测到较为明显的绿色荧光信号,表明LeMYB330和MiPDCD6蛋白互作,且互作部位为细胞核。3、进一步确定了LeMYB330与MiPDCD6蛋白的互作位点。通过研究MiPDC D6Δ（15-27aa）和MiPDCD6Δ（82-94aa）分别与Le MYB330全长的互作情况,得出与Le MYB330发生互作的MiPDCD6的片段为15-27aa,即第一个Ca2+结合域;通过研究LeMYB330Δ（9-61aa）、Le MYB330Δ（62-116aa）和LeMYB330Δ（9-116aa）分别与MiPDCD6全长的互作情况,得出与MiPDCD6发生互作的LeMYB330的片段为9-61aa、62-116aa和9-116aa,即R2R3结构域。4、探明了VIGS介导的番茄组培苗的沉默效应,利用番茄叶片组织培养的方法对VIGS介导的MiPDCD6与LeMYB330沉默苗进行保存培养,提取组培苗的RNA进行TRV检测,电泳结果显示叶片和根部均有TRV病毒,且根部含量较多,对LeMYB330与MiPDCD6的表达量进行qRT-PCR检测,结果表明沉默效应消失。