产妇子宫平滑肌CPI-17信号通路介导的钙敏感性变化与宫缩乏力性产后出血关系的研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:kuxinghuajia
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目的研究PKCα/β特异性抑制剂Go6976、PKCβ特异性抑制剂LY333531和Rho激酶特异性抑制剂Y-27632对宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌自发性收缩和收缩潜能的抑制作用,及宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌CPI-17信号通路分子CPI-17表达、PKC及Rho激酶活性变化,探讨CPI-17信号通路介导的钙敏感性变化在宫缩乏力性产后出血发病中的作用。方法选择2010年11月至2011年12月住福建省妇幼保健院产科,择期子宫下段剖宫产分娩初产妇60例,分为宫缩乏力性产后出血组(病例组,n=30)和宫缩良好无产后出血组(对照组,n=30)。采用肌条等长张力测定方法检测产妇子宫下段平滑肌分别在PKCα/β特异性抑制剂Go6976、PKCβ特异性抑制剂LY333531和Rho激酶特异性抑制剂Y-27632作用下自发性收缩功能变化;同时检测病例组子宫下段平滑肌及其分别在PKCβ特异性抑制剂LY333531、Rho激酶特异性抑制剂Y-27632作用下对梯度浓度缩宫素(10-4U/mL10-1U/mL)诱导的收缩潜能变化。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术和免疫印迹法检测产妇子宫下段平滑肌CPI-17mRNA和p-CPI-17(Thr38)蛋白表达;采用非放射性蛋白激酶检测法和免疫印迹法分别检测产妇子宫下段平滑肌PKC活性和p-MYPT-1(Thr696)蛋白表达(代表Rho激酶活性);并分析产妇子宫平滑肌PKC活性、Rho激酶活性与p-CPI-17(Thr38)蛋白的表达水平及PKC活性、Rho激酶活性、p-CPI-17(Thr38)蛋白的表达水平与其自发性收缩活动力、产后24h出血量的相关性。结果1.病例组产后24h出血量和子宫平滑肌自发性收缩幅度、频率及活动力均低于对照组(P<0.05)。2.10-6mol/LPKCα/β特异性抑制剂Go6976、10-6mol/LPKCβ特异性抑制剂LY333531和10-5mol/LRho激酶特异性抑制剂Y-27632均显著抑制两组产妇子宫平滑肌收缩幅度及活动力(P<0.05),对病例组抑制作用均小于对照组(P<0.05)。3.在缩宫素浓度为10-3U/mL、10-2U/mL、10-1U/mL时,病例组的收缩潜能均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PKCβ特异性抑制剂LY333531和Rho激酶特异性抑制剂Y-27632均可显著降低病例组收缩潜能,差异有统计学意义(P<0.05)。4.病例组子宫平滑肌CPI-17mRNA表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);病例组子宫平滑肌p-CPI-17(Thr38)蛋白表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。5.病例组子宫平滑肌PKC活性和Rho激酶活性均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。6.相关性分析结果显示:两组产妇子宫平滑肌PKC活性、Rho激酶活性与p-CPI-17(Thr38)蛋白表达水平均呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);两组产妇子宫平滑肌PKC活性、Rho激酶活性及p-CPI-17(Thr38)蛋白表达水平与其自发性收缩活动力均呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);两组产妇子宫平滑肌PKC活性、Rho激酶活性及p-CPI-17(Thr38)蛋白表达水平与产后24h出血量均呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌收缩功能明显减弱及对梯度浓度缩宫素诱导的收缩潜能明显降低,提示宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌对缩宫素的反应性低于宫缩良好无产后出血产妇。2. PKCα/β特异性抑制剂Go6976、PKCβ特异性抑制剂LY333531和Rho激酶特异性抑制剂Y-27632对宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌收缩幅度及活动力的抑制作用均小于宫缩良好无产后出血产妇,且PKCβ特异性抑制剂LY333531和Rho激酶特异性抑制剂Y-27632均可显著降低宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌收缩潜能。PKCα、PKCβ和Rho激酶调节子宫平滑肌收缩,可能参与宫缩乏力性产后出血的发生。3.子宫平滑肌组织p-CPI-17(Thr38)蛋白表达水平及PKC活性、Rho激酶活性与其收缩活动力均呈正相关,与产后24h出血量均呈负相关,表明CPI-17蛋白的磷酸化及PKC活性、Rho激酶活性调控子宫平滑肌的收缩功能。4.宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌组织p-CPI-17(Thr38)蛋白表达低于宫缩良好无产后出血产妇,与宫缩乏力性产后出血的发生相关。5.宫缩乏力性产后出血产妇子宫平滑肌组织PKC活性低于宫缩良好无产后出血产妇,且PKC活性与p-CPI-17(Thr38)蛋白表达水平密切相关,PKC/CPI-17信号通路活化受阻可能是宫缩乏力性产后出血发病的重要因素之一。6.宫缩乏力性产后出血子宫平滑肌组织Rho激酶活性低于宫缩良好无产后出血产妇,且Rho激酶活性与p-CPI-17(Thr38)蛋白表达水平密切相关,Rho激酶/CPI-17信号通路激活受阻介导宫缩乏力性产后出血的发生。
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