慢病毒载体介导的过表达FOXO1对人肝癌细胞HepG2中水通道蛋白9表达的影响

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目的:观察慢病毒载体介导的FoxO1基因过表达对水通道蛋白9(AQP9)在人肝癌细胞HepG2中表达的影响。方法:构建含FOXO1编码序列的过表达慢病毒载体pWPI-FOXO1;采用慢病毒载体pWPI-FOXO1感染人肝癌细胞HepG2,流式细胞仪荧光分选稳定表达GFP的HepG2细胞;实验分为空白对照组、pWPI组和pWPI-FOXO1组,采用实时荧光定量PCR及Western blot方法验证FOXO1在pWPI-FOXO1组HepG2细胞中的过表达;应用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测FOXO1过表达后,AQP9在人肝癌细胞HepG2中的表达变化。结果:成功构建含FOXO1编码序列的过表达慢病毒载体pWPI-FOXO1;成功分选感染慢病毒载体pWPI-FOXO1及空载体pWPI后稳定表达GFP的HepG2细胞;pWPI-FOXO1组FOXO1mRNA及蛋白水平较pWPI组和空白对照细胞中明显增强(P<0.05),AQP9的mRNA及蛋白水平在稳定过表达FOXO1的HepG2细胞中亦明显升高(P<0.05)。结论:慢病毒载体介导的FoxO1基因过表达对AQP9在人肝癌细胞HepG2中表达具有确切的影响,AQP9mRNA和蛋白的表达随FoxO1表达增强而升高,表明FOXO1在AQP9的表达调控中起到一定的作用,但其具体机制有待进一步研究。
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