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目的:磁共振对比剂CREKA-(Gd-DOTA)4是一种具有靶向纤维蛋白-纤维连接蛋白复合物(fibrin-fibrinectin complexes)的试剂。纤维蛋白-纤维连接蛋白复合物广泛存在于中或高度恶性肿瘤细胞外基质,而良性肿瘤与正常组织中极少存在或不存在。靶向磁共振对比剂CREKA-(Gd-DOTA)4处于临床前试验研究阶段,目前已经运用到前列腺癌、乳腺癌等恶性肿瘤的研究中,但在结肠癌中的研究鲜有报道。因此,本实验主要探究CREKA-(Gd-DOTA)4在荷人结肠癌SW1116细胞裸小鼠模型中的影像表现。方法:1、构建结肠癌裸小鼠模型。在细胞实验平台进行人结肠癌细胞SW1116的复苏、培养及传代,待细胞数量达到5×106/ml时,将0.2—0.4ml SW1116细胞悬液经腋窝皮下接种到BALB/C雄性裸小鼠(4-5 W,18-22 g,n=20)中,构建结肠癌裸小鼠模型。接种后密切观察裸小鼠生长情况,当瘤体直径达到0.8-1.2 cm时,则认为达到磁共振扫描标准。2、实验分组与MR扫描。将达到扫描标准的15只荷瘤裸小鼠随机分为实验组(n=9)与对照组(n=6),实验组裸小鼠通过尾静脉注射0.01 mmol/L的靶向磁共振对比剂CREKA-(Gd-DOTA)4,对照组注射同等剂量的常规磁共振对比剂钆喷酸葡胺注射液(Gd-DTPA)。使用布鲁克(Bruker)7T磁共振成像仪行平扫及注射对比剂后5 min、10 min、20 min、30 min、40 min、50 min、60 min动态增强扫描,扫描参数设置如下:TR=500 ms,TE=8.0 ms,90°flipangle,1.5mmslicethickness,fov=3cm。3、病理染色与免疫组化。扫描完成后,立即处死荷瘤裸小鼠,取出肿瘤标本固定于4%多聚甲醛溶液,并行he及免疫组织化学染色,免疫组化使用的一抗为anti-fibronectinantibody。4、观察指标与统计学方法。(1)强化程度:通过影像图像直观分析;计算对比噪声比(cnr)以及对比度比(cr)进行分析,并对两组数据进行重复测量资料方差分析(rmanova)。(2)强化持续时间:通过对比噪声比(cnr)进行分析。(3)肌肉组织强化表现:分别测量实验组与对照组强化前后肌肉组织mr信号,采用spss22.0软件对两组数据进行配对t检验。若p<0.05,则表示具有统计学意义。(4)图像质量评价。主要从图像质量、图像伪影以及空间分辨率3个方面进行评价。结果:1、强化程度与强化持续时间。靶向磁共振对比剂creka-(gd-dota)4与常规磁共振对比剂gd-dtpa对结肠癌肿瘤强化效果的差异性具有统计学意义(p<0.05)。在注射对比剂后5min–60min的各个时间点,实验组肿瘤强化的cnr值均明显高于对照组。实验组注射磁共振对比剂creka-(gd-dota)4在10min内迅速升高并达到峰值(峰值cnr=14.8146),同时出现持续20min左右的明显强化平台期,注射对比剂30min后,逐渐出现下降趋势。对照组在注射对比剂gd-dtpa10min后达到峰值(峰值cnr=10.2424),随后开始缓慢下降,且未出现平台期。2、肌肉组织强化表现。实验组注射对比剂creka-(gd-dota)45min后,肌肉组织信号值较平扫时稍降低,但两者差异不具有统计学意义(p>0.05);对照组注射gd-dtpa5min后,肌肉组织信号值较平扫时稍增高,差异具有统计学意义(p<0.05)。3、病理染色及免疫组化结果。肿瘤标本he染色可见大量异型性细胞,核大深染,结构排列紊乱,可见较多病理性核分裂像,符合裸小鼠结肠癌特征。免疫组织化学通过使用anti-fibronectin抗体进行免疫组化分析证实纤维蛋白-纤维连接蛋白复合物在结肠癌肿瘤细胞外基质中高度表达,而在空白对照的正常肌肉组织中几乎没有表达。结论:1、磁共振对比剂CREKA-(Gd-DOTA)4对裸小鼠人结肠癌组织具有强化效应,而对肌肉等正常组织没有强化,说明其对结肠癌组织具有靶向性。2、磁共振对比剂CREKA-(Gd-DOTA)4相对于常规非特异性对比剂Gd-DTPA,对肿瘤组织强化程度显著、持久,表明其具有弛豫率高、显像时间长等影像强化特点。3、磁共振对比剂CREKA-(Gd-DOTA)4具有潜在的临床前应用价值,为结肠癌病变的早期发现、早期诊断提供了可能。