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近年来,随着家禽养殖业不断向规模化、集约化发展,高密度的养殖环境以及环境中各种刺激因子导致家禽免疫力和抗病力下降,生产性能下降。寻找绿色、安全并能够改善机体免疫力及提高畜禽生产性能的饲料添加剂成为了现代畜牧业发展的必然趋势。乳酸菌胞外多糖（Exopolysaccharide,EPS）由乳酸菌合成并分泌,具有免疫调节、抗氧化和抑菌等生物活性,且具有安全、无毒,适宜剂量能够改善畜禽生产性能、增强机体免疫和抗氧化功能等优点。本试验分离纯化得到了植物乳杆菌PA01胞外多糖组分EPS2,并对EPS2的结构及免疫调节活性进行了研究,为其在家禽生产中的应用提供理论依据。试验一植物乳杆菌胞外多糖的提取纯化、结构表征采用MRS液体培养基发酵植物乳杆菌PA01,并利用乙醇沉法从发酵液中提取粗胞外多糖,经离子交换柱层析进一步分离纯化,得到两种纯化组分EPS1、EPS2,利用CCK8法检测两组分对RAW 264.7细胞的增殖活性,EPS2表现出更高的促增殖作用,因此选择其进行进一步研究。结构表征结果表明:EPS2中不存在蛋白质和核酸;分子量为7.334×104 Da;含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和氨基葡萄糖,属于杂多糖;含有18种糖苷键,其中t-Manp（1→、→2）-Manp（1→、→2）-Glcp（1→、→6）-Manp（1→、→3）-Glcp（1→、→2,6）-Manp(1→占比较大;EPS2的主链为β-D-Manp（1→[2）-α-DManp（1]n→2）-α-D-Manp（1→2）-α-D-Manp（1→2）-α-D-Manp（1→6）-α-D-Manp（1→,支链连接在主链的2,6）-α-D-Manp-(1→上;EPS2呈不规则片状或碎屑状堆积,表面粗糙并具有多孔结构和较小的球形碎片。试验二植物乳杆菌胞外多糖对RAW 264.7细胞免疫调节作用的研究利用RAW 264.7细胞研究EPS2的体外免疫调节活性。试验设置空白对照组,不同浓度EPS2组（50、100、200、400μg/m L）和LPS阳性对照组（1μg/m L）,处理时间24 h。结果显示,EPS2在50-400μg/m L浓度内对RAW 264.7细胞的增殖有促进作用（P＜0.05）,能显著增强RAW 264.7细胞的吞噬活性（P＜0.05）,并能显著刺激NO、IL-6、TNF-α的分泌（P＜0.05）;EPS2处理后p-p38/p38、p-ERK1/2/ERK1/2及pJNK1/2/JNK1/2水平均有所升高,且在EPS2浓度为100-400μg/m L时,达到显著水平（P＜0.05）。上述结果表明,EPS2对RAW 264.7细胞具有免疫调节作用,并与MAPKs信号转导通路有关。试验三植物乳杆菌胞外多糖对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的影响试验选取40只BALB/c小鼠,分为4个处理组,每组10个重复。正常对照组（NC）:每天给予生理盐水;环磷酰胺模型组（CY）:每天给予生理盐水,并在7~10天同时给予环磷酰胺（80 mg/kg.bw）;EPS2组（EPS2）:每天给予EPS2溶液（50 mg/kg.bw）;EPS2+环磷酰胺组（EPS2+CY）:每天给予EPS2溶液（50 mg/kg.bw）,并在7~10天同时给予环磷酰胺（80 mg/kg.bw）。给药方式均为腹腔注射,注射体积0.1 m L。结果显示,试验期间NC组和EPS组小鼠未发现异常状况,随着环磷酰胺处理的次数增加,CY组小鼠精神出现萎靡、活动减少,EPS+CY组小鼠上述状况较CY组有所改善;EPS2处理极显著提高免疫抑制小鼠的脾脏指数（P＜0.01）,且改善环磷酰胺所致的小鼠的脾脏损伤,促进免疫抑制小鼠脾脏中Con A诱导的T淋巴细胞增殖和LPS诱导的B淋巴细胞增殖作用（P＜0.01）,并极显著提高免疫抑制小鼠脾脏Il-4、Il-2的m RNA的表达（P＜0.01）;此外,EPS2能提高免疫抑制小鼠外周血中白细胞和血小板数量。上述结果表明,EPS2可以提高免疫抑制小鼠的免疫能力。综上所述,本试验通过分离纯化得到植物乳杆菌PA01胞外多糖EPS2,初步分析了EPS2的结构,且发现EPS2具有良好的免疫调节作用,能够促进RAW 264.7细胞增殖、吞噬能力及分泌细胞因子,并能够抵抗环磷酰胺所致的免疫抑制。本研究为解析EPS结构与功能的关系及开发乳酸菌EPS免疫增强剂提供理论依据。