~(99m)Tc及~(90)Y标记抗胃癌单克隆抗体3H11的研究

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胃癌在中国的发病率很高。在过去的临床研究中,131I标记的抗人胃癌单克隆抗体3H11可以诊断出X光或CT没有发现的肿瘤。为了进一步提高放射免疫显像质量和解决放射免疫治疗的问题,本研究将制备99mTc和90y标记的3H11,并对其进行体内外评价。通过改进的Schwarz直接标记法和使用HYNIC(S-hydrazinonicotinamide)作为双功能联结剂的间接标记法我们成功的制备出99mTc-3H11和99mTc-HYNIC-3H11。比较了两种标记物在生理盐水、小牛血清、DTPA(Diethylenetriamine pentaacetic acid)和半胱氨酸(cysteine)中的稳定性,同时研究了两种标记抗体在荷瘤裸鼠的生物分布及γ显像。本研究中90Y标记单抗3H11使用DOTA(1,4,7,10-tetraazacyclododecanet etraacetic acid)作为双功能联结剂。在成功的制备出90Y-DOTA-3H11后,研究了标记物在生理盐水和小牛血清中的稳定性。参考Lindmo方法,测定了90Y-DOTA-3H11的放射免疫活性分数,同时还研究标记抗体在小鼠血液中的清除及荷瘤裸鼠生物分布。制备的99mTc-3H11和99mTc-HYNIC-3H11的标记率分别大于95%和90%。经过PD-10柱纯化后,两种标记物的放射化学纯度均大于99%。稳定性实验结果表明,两种标记抗体在生理盐水和血清中均有良好的稳定性,但99mTc-3H11在1000倍或更高浓度半胱氨酸竞争实验中稳定性明显差于99mTc-HYNIC-3H11。生物分布研究中,注射后24h,肿瘤放射性摄取(%ID/g)分别为15.8%(99mTc-3H11)和31.2%(99mTc-HYNIC-3H11),99mTc-3H11和99mTc-HYNIC-3H11的靶与非靶(T/NT)比值分别为:1.8和1.9(瘤比血)、19.0和21.4(瘤比肌肉)、9.56和15.1(瘤比胃)。γ显像研究显示,与阴性对照99mTc-IgG相比,99mTc-3H11和99mTc-HYNIC-3H11在注射后24h均能得到清晰的肿瘤显像。90Y-DOTA-3H11的标记率大于95%,并且在生理盐水和血清中均有良好的稳定性。标记后的抗体能够保留72.4%的免疫活性。血液清除符合二室模型,其中T1/2α和T1/2β分别为1.43h和69.7h。荷瘤裸鼠生物分布实验结果显示90Y-DOTA-3H11在肿瘤中具有良好的浓聚。注射后24h肿瘤对90Y-DOTA-3H11的摄取(%ID/g)为36.6%±5.7,与非靶组织如血、肌肉、骨、肾、肝及胃的(T/NT)比值分别为1.26、12.8、6.13、2.34、1.89和10.17。99mTc-HYNIC-3H11和90Y-DOTA-3H11显示出良好的体内外稳定性和良好的肿瘤靶向性,有望成为用于胃癌放射免疫显像及治疗的放射性药物。
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