【摘 要】
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乙型肝炎病毒(HBV)感染是急慢性肝炎的主要原因,其与肝纤维化和肝细胞癌的发生密切相关,在治疗上缺乏理想的抗病毒药物。随着小干涉RNA(siRNA)制备技术的进步,应用RNA干涉(RN
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乙型肝炎病毒(HBV)感染是急慢性肝炎的主要原因,其与肝纤维化和肝细胞癌的发生密切相关,在治疗上缺乏理想的抗病毒药物。随着小干涉RNA(siRNA)制备技术的进步,应用RNA干涉(RNAi)针对一些病毒感染性疾病如HIV感染的治疗研究取得一系列成功。本文针对HepG2.2.15细胞中的HBV S区、C区,设计合成HBV特异性shRNA表达质粒和随机对照shRNA表达质粒,转染HepG2.2.15细胞,观察不同浓度、转染后不同时间该体系产生的siRNA对HBV复制和表达的抑制作用。结果表明:特异性shRNA表达质粒对HBV的复制和表达均存在抑制作用,特异性shRNA表达质粒对HBV的复制和蛋白表达在一定范围内呈现剂量相关性;在转染后第六天shRNA表达质粒对HBV表达的抑制率最高;不同位点的特异性shRNA表达质粒对HBV的复制和蛋白表达的抑制作用不同,针对S区的shRNA表达质粒SC-S对HBV的抑制作用较强。本文使用shRNA表达质粒在HepG2.2.15细胞水平进行抗HBV治疗研究,为进一步的体内实验和临床使用提供了重要的理论基础、技术路线和实验方法。
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