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黑骨藤系民间习用药材,为萝藦科杠柳属植物西南杠柳PeriplocaforrestiiSchltr.的全株。已广泛应用于治疗风湿、类风湿性疾病,其疗效突出,在《中华本草·苗药卷》中收载为苗药。苗族医药作为祖国重要的医药卫生资源,已引起地方政府及医药学工作者的重视。因此,对苗药的开发利用有重要意义。本文以苗药黑骨藤抗类风湿性关节炎作用为研究对象,筛选有效部位,探讨其作用机制,分析有效部位化学成分,探索作用的相关药效物质基础。
目的:研究苗药黑骨藤的抗炎和镇痛作用,筛选出作用的有效部位;研究有效部位对实验性类风湿性关节炎大鼠的防治作用及作用机制与药效物质基础。
方法:用经典的抗炎和镇痛模型——醋酸扭体法、热板法和二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、腹腔毛细血管通透性法、蛋清致足肿胀法,研究黑骨藤的抗炎和镇痛作用,筛选有效部位。建立实验性类风湿性关节炎(AA)大鼠模型,观察给药后,药物对AA大鼠体重、关节原发与继发肿胀及组织病理形态学等变化的影响;测其脏器指数,观察药物对免疫器官的影响;取外周血,观察白细胞总数;取血清、组织液,测定其中IL-1、IL-6、TNF-a和NO/NOS的含量水平;取关节滑膜组织,用免疫组织化学的方法,研究细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在AA大鼠炎症反应过程中的表达情况;分析有效部位中的化学成分。从而探索黑骨藤有效部位对AA大鼠的防治作用及作用的器官、分子免疫学机制与药效物质基础。
结果:黑骨藤具有明显的抗炎和镇痛作用,其作用的有效部位在醇提乙酸乙酯萃取部;病理形态学表明:成功建立了AA大鼠模型;有效部位对AA大鼠具有预防和治疗作用;能有效增强免疫器官的功能,降低外周血中自细胞总数;能有效降低AA大鼠血清、组织液中炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-a的含量;能有效地抑制血清中NOS的活性,使AA大鼠血清中NO的含量降低;能有效抑制AA大鼠关节滑膜组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达;有效部位含有生物碱、强心甙类成分,并从中分离鉴别出五个化合物,分别为:α-香树素乙酸酯(α-amyrinacetate)(3-O-acetyl-12-ursen)(2),β-谷甾醇(β-sitosterol)(3),胡萝卜甙(daucosterol)(5),杠柳甙元(periplogenin)(9),北五加皮甙E(glycosideEofPeriplocasepium)(△5-pregnene-3β,17α,20(S)-triol-20-O-β-D-canaro-pyranoside)(11)。
结论:研究结果表明黑骨藤具有明显的抗炎和镇痛作用,对佛氏完全佐剂导致的AA大鼠具有明显的预防和治疗作用。其作用机制可能是通过增强AA大鼠免疫器官的功能,降低外周血中自细胞总数及血清、组织液中IL-1β、TNF-a、IL-6的含量水平,从而减轻炎性浸润;抑制NOS的活性,降低血清中NO的浓度;抑制关节滑膜组织中ICAM-1表达来实现的。有效部位的化学成分分析表明:作用的相关药效物质可能是生物碱、强心甙等成分,单体化学成分起作用还是其化学成分群共同作用的结果,有待以后的实验研究证明。