人参皂苷分布在人参Panax属植物的根茎、茎叶和花蕾等部位,有提高免疫、抗衰老、抗肿瘤等药理活性。研究表明,人参皂苷通常转化为短糖链的次生皂苷或苷元从而在体内发挥生物活性,这些次生皂苷含量较少、结构独特、活性显著,因此又被称为稀有人参皂苷。目前,稀有人参皂苷的制备方法主要有微波法、高温法、酸碱法、酶法、内生菌转化法、合成生物法等,本文以药材为起始原料,结合物理法和化学法探究一种稀有人参皂苷新的制备方法,然后采用溶媒提取和大孔树脂纯化的方法制备稀有人参皂苷提取物,最后以新生血管抑制活性为指标初步评价其生物活性。主要研究内容如下:1人参皂苷高温高压酸水解转化产物的化学研究首先制备稀有人参皂苷单体,为后期的工艺优化和活性研究做基础。本部分以人参药材为原料,采用高温高压酸水解的方法制备稀有人参皂苷,通过硅胶柱层析、大孔吸附树脂、C18反相柱层析、中压制备液相色谱法以及Sephadex LH-20等分离纯化方法获得单体化合物,最后采用核磁共振波谱技术方法鉴定单体化合物。共从水解物中分离出5个化合物,经鉴定为稀有人参皂苷Rk3、20（S）-Rg3、20（R）-Rg3、Rk1和Rg5。2稀有人参皂苷提取物的制备工艺研究为了提高稀有人参皂苷类成分的得率,对高温高压酸水解法制备稀有人参皂苷类成分进行工艺优化。在前文的基础上,本部分建立了5种稀有人参皂苷的HPLC含量测定方法。以转化后5种稀有人参皂苷的含量为指标,筛选了三七、人参和西洋参三种药材,结果显示三七转化后的含量最高,故选择以三七为原料进行制备工艺的研究。制备工艺优化采用三因素三水平Box-Behnken响应面实验设计法,得最优制备工艺条件:（1）水解部分:时间30 min,醋酸浓度5%,温度134℃,料液比1:15（g:m L）;（2）提取部分:超声功率为200W,时间30 min,乙醇浓度68%,温度35℃,料液比1:10（g:m L）。制备工艺优化后,三七药材经高温高压酸水解获得稀有人参皂苷类成分含量为72.07±3.16 mg/g,干膏率为47.94±4.12%。3稀有人参皂苷提取物纯化工艺研究高温高压酸水解制备所得产物,除含有人参皂苷类成分外,还含有一些非人参皂苷类杂质,为提高稀有人参皂苷类成分的纯度,对水解产物进行纯化工艺的研究。采用静态吸附和解吸实验选择最佳纯化大孔树脂,再通过单因素实验考察了纯化稀有人参皂苷类成分的条件。确定出了最佳纯化条件:大孔吸附树脂为D101,上样液质量浓度为64 mg/m L,上样体积为2 BV,水洗至洗脱液无色,弃去30%乙醇洗脱4 BV,最后收集70%乙醇洗脱部分,洗脱9 BV。精制后的5种稀有人参皂苷平均纯度为59.46%,纯度提高了48.07%,达到了纯化目的。4稀有人参皂苷对肿瘤及新生血管作用的研究为明确水解后的次级人参皂苷与水解前的人参皂苷活性差异,探讨了三七水解物和三七提取物对肿瘤和血管新生抑制的影响。本部分采用了CCK-8实验和细胞划痕实验,考察了三七水解物和三七提取物对MDA-MB-231乳腺癌肿瘤细胞生长和迁移的影响。以及利用鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验,考察了三七水解物和三七提取物对新生血管生成的影响。结果显示,三七水解物和三七提取物都能抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖和迁移,而三七水解物表现出较三七提取物更强的细胞毒性;三七提取物和三七水解物对鸡胚尿囊膜上的血管生成也有一定的抑制作用,三七水解物抑制新生血管生成活性较三七提取物更强。结果揭示了三七水解物生物活性比三七提取物稍强。