基于支持细胞线粒体自噬途径研究五子衍宗丸改善生精功能机理

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男性不育发病率逐年上升,中医药治疗男性不育具有悠久历史,获得了良好的疗效,目前仍是临床中常规的治疗方法。中医学认为“肾藏精,主生殖”,“肾精”决定着男性的生育能力。临床中肾精亏虚是男性不育的主要原因,五子衍宗丸是补肾益精的代表方,临床用药多在此方基础上加减,然其药效及作用机理尚不明确,研究五子衍宗丸改善生精功能机理,以更好的指导临床用药是当前的迫切需要。论文包括文献综述和实验研究两大部分。第一部分总结了近年来中医学和现代医学在男性不育的研究进展,归纳了现代医学治疗男性不育现状;整理了中医学对男性不育病因病机认识及中医诊治进展;总结了五子衍宗丸改善男性不育临床疗效及机理研究,并从现代医学角度探讨了线粒体自噬与五子衍宗丸改善生精功能之间的联系。实验研究主要包括以下4个方面。目的:观察五子衍宗丸对肾精亏虚大鼠支持细胞线粒体自噬水平及生精功能的影响。方法:正常SD雄性大鼠25只,随机分为5组,每组5只。分别为对照组,模型组,五子衍宗丸低剂量组、中剂量组和高剂量组,每日灌胃两次。对照组早晚均予0.5%CMC-Na (10mL/kg)灌胃;模型组早上给予GTW (20mg/kg),晚上给予0.5% CMC-Na (10mL/kg);低剂量组早上给予GTW (20mg/kg),晚上给予五子衍宗丸0.5g/kg·d;中剂量组早上给予GTW (20mg/kg),晚上给予五子衍宗丸1.0g/kg·d;高剂量组早上给予GTW (20mg/kg),晚上给予五子衍宗丸2.0g/kg·d。1个月后麻醉下取大鼠睾丸及附睾组织。TOx IVOs精子分析系统测定精子活力、浓度和总数,免疫组织化学染色分析自噬相关蛋白LC3、LAMP-2的表达,透射电镜观察自噬小体数目。结果:雷公藤多甙可降低大鼠LC3、LAMP-2表达、减少自噬小体的数量,降低精子活力、浓度和精子总数。与模型组相比,中剂量五子衍宗丸组大鼠精子活力增加,高剂量五子衍宗丸组大鼠精子活力、浓度和总数均明显增加,同时低、高剂量五子衍宗丸组大鼠LC3表达明显增高,中、高剂量五子衍宗丸组大鼠LAMP-2表达明显增高,低剂量五子衍宗丸组自噬小体数目增多。结论:五子衍宗丸通过调控支持细胞线粒体自噬改善生精功能
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