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目的:确定通窍活血汤（Tongqiao Huoxue Decoction,THD）的提取工艺以及开展其治疗脑梗死病（Cerebral infarction,CI）的代谢组学研究。以体内的内源性小分子物质变化水平,探讨通窍活血汤治疗脑梗死的代谢机制。为临床应用通窍活血汤治疗脑梗死提供科学可靠的实验性数据支持。方法:1.通窍活血汤的提取工艺研究运用高效液相色谱法（High performance liquid chromatography,HPLC）,以通窍活血汤的4种化学成分为指标,建立方法学进行分析,应用BoxBehnken设计（Box-Behnken Design,BBD）对其提取工艺优化,得出通窍活血汤的最佳提取工艺。2.通窍活血汤治疗脑梗死的代谢组学研究采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,建立大脑中动脉闭塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型大鼠。实验分为模型（Model）组、THD组、去活血（Without Huoxue,WHX）组,假手术（Sham）组共4组,进一步采用Zea-Longa法对大鼠进行神经行为学评分;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色法观察脑梗死面积及测定;采用干湿重法进行大鼠脑含水量的测定;并采用苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色法观察大鼠脑梗死区域组织的形态学变化。通过超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法（Ultra high performance liquid chromatography quadrupole time-of flight mass spectrometer,UPLC-Q-TOF/MS）,进行代谢组学分析。收集大鼠的尿液和血清,并对其进行分析,运用主成分分析（Principal component analysis,PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（Orthogonal partial least squares analysis-Discriminant analysis,OPLS-DA）等方法建立模型,进行数据分析。筛选内源性的差异性代谢物,并分析相关的代谢途径,探讨THD对CI大鼠的代谢影响。结果:1.通窍活血汤的提取工艺研究建立了川芎嗪、苦杏仁苷、芍药苷、羟基红花黄色素A 4个化学成分的含量测定方法,得出通窍活血汤最佳提取工艺:乙醇体积分数为80%,料液比为1:20,提取次数为2次。2.通窍活血汤治疗脑梗死的代谢组学研究MCAO模型建立后,与Sham组相比,大鼠神经功能评分、脑梗死面积、脑含水量均显著升高,局部可见神经细胞的胞核固缩深染,神经细胞产生气球样变,核居中,胞质空泡化,间质中可见不规则的微小空洞。THD组经给药治疗后,与Model组相比大鼠神经功能评分、脑梗死面积和脑含水量均降低,脑损伤情况得到明显改善,且与WHX组相比其治疗效果更佳。代谢组学结果可知:在大鼠尿液中共筛选出51种差异性代谢物,与Sham组相比,Model组有24个代谢物水平下调,27个代谢物水平上调;大鼠血清中共筛选出34种差异性代谢物,与Sham组相比,Model组有8个代谢物水平下调,26个代谢物水平上调。实验表明THD组与WHX组大鼠经给药治疗后代谢物水平得到明显改善,且THD能调节机体更多代谢产物的水平。THD在大鼠尿液和血清中分别调节了8条和44条代谢通路,WHX在大鼠尿液和血清中分别调节了7条和20条代谢通路,主要参与了硒代谢、谷氨酸代谢、鞘脂类代谢、磷脂生物合成等代谢途径。结论:1.优化了通窍活血汤的提取工艺,确定其最佳提取工艺。2.通窍活血汤具有治疗脑梗死病的作用。通窍活血汤及其去活血药拆方均能在一定程度上改善脑梗死病大鼠的代谢紊乱,其治疗作用可能与硒代谢、谷氨酸代谢、鞘脂类代谢、磷脂生物合成等代谢途径有关。且其全方治疗效果明显优于去活血药拆方组的治疗效果。进一步分析可知,方中川芎、桃仁、红花、赤芍四味药的活血作用是全方治疗脑梗死病的关键性因素。因此,临床应用通窍活血汤治疗脑梗死病,其全方配伍中川芎、赤芍、红花、桃仁四味药不可或缺。