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银莲花属植物具有解热、镇痛、抗菌、抗炎、抗肿瘤等活性，其中皂苷类为主要生物活性成分。该属植物大火草分布于甘肃、陕西、河南、湖北、四川等省，民间常用来治疗疟疾、痢疾、小儿疳积等症，关于其化学成分特别是皂苷成分的研究报道较少。本课题综合运用硅胶柱色谱、D-101大孔吸附树脂、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及制备高效液相等技术从大火草根茎的乙醇提取物中分离得到了15个化合物，利用ESI-MS,1H-NMR,13C-NMR, DEPT,HSQC, HMBC, NOESY,1H-1H COSY, TOCSY等波谱学方法并结合化学手段鉴定了13化合物的结构，其中10个为齐墩果烷型三萜皂苷，有4个为新化合物。这些化合物分别为：7-乙基-香豆素(1),3-O-α-L-arabinopyranosyl-(1→2)-β-D-xylopyranosyloleanolic acid28-O-β-D-glucopyransyl-(1→4)-β-D-glucopyranoside(2), koreanaside1(3), hederasaponin B (4), clematiganoside A(5), huzhangoside D (6), huzhangoside D (7),3-O-β-D-galactopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-xylopyranosyl oleanane acid28-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(8),3-O-β-D-ribopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyrano-syl-(1→4)]-β-D-xylopyranosyl hederagenin28-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(9),3-O-β-D-ribopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabino-pyranosyl hederagenin28-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(10), clematichinenoside A (11), β-谷甾醇(12)和β-胡萝卜苷(13)。皂苷2,8,9和10为新化合物，分别命名为tomentosides D, C,B和A；皂苷3,5和11为首次从本属植物中获得。对部分皂苷(4-7和10)碱水解，得到5个次级苷CP2(4a), clemargenoside G (5a), clemontanoside C(6a), CP4(7a)和3-O-β-D-ribopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-α-L-arabinopyranosyl hederagenin (10a)，其中10a为新化合物，命名为tomentoside Aa。采用3种肿瘤细胞株开展的细胞毒性筛选发现，10个原生皂苷均无活性，提示该类双糖链皂苷不具备抗肿瘤作用。但是，碱水解获得的5个单糖链次级苷4a,5a,6a,7a和10a均具有较强的细胞毒性，其中7a活性最强。对该类皂苷抗肿瘤构效关系进行分析，得到了较为明确的结论。课题创新性和研究意义1.对大火草的化学成分进行了较为深入的研究，鉴定了13个化合物的结构，并通过化学手段获得5个衍生成分，这些工作使得对大火草次生代谢产物的认识更为系统。2.发现了5个新化合物，包括4个原生苷和1个次级苷。其中，皂苷8的分子中含有半乳糖，是在本属植物的皂苷中第二次发现，而皂苷2和3中由2个五碳糖组成的结构片段是首次在本属植物中发现。3.系统的肿瘤细胞毒性筛选发现了5个抗肿瘤活性化合物，并分析得到较为明确的构效关系结论，对该类型皂苷的开发具有指导意义。4.通过碱水解方式获得5个活性衍生成分，从而提示：对于无活性的皂苷成分，可以通过类似化学方法改造为具有药效的化合物，这为这些成分的开发指出了一个新方向，也是活性皂苷开发途径的有益尝试。5.大火草在我国有较为广泛的分布，本研究为这一丰富的植物资源的利用提供了科学依据。课题组已对2种银莲花属植物太白银莲花和小花草玉梅开展了系统研究，本课题为该属的进一步研究积累了新的资料，加深了对该属植物成分的认识，为该属植物的开发打下良好的基础。同时，也为进一步开发抗肿瘤新药提供了有价值的先导化合物。