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背景与目的脊髓损伤（Spinal Cord Injury,SCI）是发生于中枢神经系统的严重致残性疾病,多由交通伤、战伤等意外伤害导致。脊髓损伤后引起损伤节段以下肢体严重的功能障碍、膀胱排尿功能障碍、神经病理痛、括约肌及自主神经功能障碍等。我国SCI的发病率相对较高,达到23.7-60.6/1000000[1,2],SCI常发病突然且终身残疾率高,对患者和其家庭的生活产生长期而持续的负面影响,也给社会带来了巨大负担。星形胶质细胞是一种广泛存在于中枢神经系统的支持细胞,生理状态下具有支持和引导神经元迁移、维持突触生理功能,构成血脑屏障及协助神经元代谢等功能。脊髓损伤后,静息状态的星形胶质细胞过度活化,分泌神经抑制因子和细胞外基质,如胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、胶原蛋白等,导致神经细胞的凋亡、炎症[3]。因此,SCI后如何抑制星形胶质细胞的过度活化,减少神经元的死亡,在SCI修复中具有十分重要的意义。间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）是一类具有多向分化潜能的多能干细胞,是对脊髓损伤的细胞移植治疗中最常应用的细胞类型之一。MSCs分泌多种神经保护性营养因子,对星形胶质细胞活化也具有较强的多靶点调控作用。MSC来源的外泌体（exosomes）是由MSCs主动分泌的大小均一,直径约40100nm的膜性囊泡小体。其内含有多种蛋白质、RNA、DNA等,在不同细胞间进行信息传递。MSCs外泌体不仅能模拟MSCs多数的生物学功能,促进组织修复和治疗疾病,且在很多方面比MSCs更有优势,因此具有广阔的临床应用前景。本研究提取大鼠骨髓间充质干细胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）来源的外泌体,通过尾静脉注射将外泌体应用于实验性SCI的大鼠,检测损伤后特定时间点其后肢运动功能恢复情况、损伤处活化星形胶质细胞和残余神经元数量,初步探索BMSCs来源的外泌体对脊髓损伤后大鼠运动功能恢复、星形胶质细胞活化的影响。材料与方法全骨髓培养法培养BMSCs并用流式细胞术鉴定其表面标志CD90和CD34。收集BMSCs上清液,超速离心法提取并用PKH26染液标记外泌体,透射电镜观察其微观结构,Western blot法检测其表面标志物CD63、CD9的表达水平。将外泌体通过尾静脉注射的方法应用于SCI大鼠,于SCI后各时间点进行后肢运动功能（basso,beattie and bresnahan,BBB）评价,并于预定时间点处死大鼠、取损伤脊髓段约1.5 cm,免疫荧光法检测星形胶质细胞活化数量和残余神经元数量。结果1.培养的骨髓间充质干细胞阳性表达CD90,阴性表达CD34。2.提取的外泌体在电镜下呈茶托状外形,直径约40100nm,Western blot法检测其阳性表达CD63和CD9。3.术后14d、28d治疗组神经功能有一定程度改善,与损伤组间差异有统计学意义（p<0.05）。4.术后7d、14d、28d治疗组反应性星形胶质细胞数量较损伤组明显降低,差异具有统计学意义（p<0.05）。5.术后7d、14d、28d治疗组残余神经元数量高于相应时间点损伤组,差异具有统计学意义（p<0.05）。结论BMSCs分泌的外泌体可减少脊髓损伤区域活化星形胶质细胞的数量,减少神经元的死亡,有利于脊髓损伤后后肢运动功能的改善。