山东地区大叶藻的保护遗传学与繁殖生物学初步研究

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本研究围绕海草场恢复所需要的技术和资料,采用保护遗传学和繁殖生物学方法对山东典型海草大叶藻进行了研究,以期为海草的保护提供遗传学资料,为海草场修复工作提供技术支持。主要结论如下:一、2011年8月至10月对山东地区大叶藻科(Zostraceae)海草进行了抽样调查。在形态学分类的基础上,基于ITS序列分析技术对山东地区大叶藻科海草进行了分类鉴定,结果显示山东地区主要存在3种大叶藻科海草,分别是大叶藻属(Zostera)的大叶藻(Zosteramarina)、矮大叶藻(Zosterajaponica)以及虾形藻属(Phyllospadix)的红须虾形藻(Phyllospadix iwatensis)。其中,大叶藻(Zostera marina)分布广泛,莱州湾、俚岛、小石岛、楮岛、汇泉湾等地均发现有大叶藻存在,莱州湾地区大叶藻呈斑状分布,汇泉湾呈零星分布,俚岛、小石岛、楮岛地区呈片状分布;矮大叶藻分布较少,莱州湾地区呈斑状分布,广饶地区零星分布;红须虾形藻仅在青岛石老人海水浴场有发现,呈斑状分布。调查还发现山东近海沿岸大叶藻海草场都存在不同程度的退化和破坏,除俚岛、小石岛、楮岛的大叶藻呈片状分布以外,其他地区的大叶藻均呈斑状分布或者零星分布。日照东港地区的海草场更是破坏严重,且本次调查范围内未发现有大叶藻存在。二、应用RAPD技术,对自然分布于山东地区莱州湾、小石岛、俚岛、楮岛、汇泉湾5个大叶藻种群的遗传多样性和遗传结构进行了分析,并基于研究结果对山东地区大叶藻种群保护和移植修复提出了建议。实验用10条RAPD引物共扩增出42条带,多态条带39条,多态性位点比率为92.86%。研究结果表明山东地区大叶藻种群具有较高的遗传多样性和较高的遗传分化;AMOVA分析显示5个种群99.68%的变异来源于种群内部,而0.32%的变异来源于种群间;Mantel测试表明5种群遗传距离与地理距离之间没有相关性;遗传多样性最低的是莱州湾种群,应该得到优先保护;遗传多样性较高的是俚岛种群和汇泉湾种群,可以作为山东地区海草场移植修复的首选种群。三、对大叶藻不同生长状态的生殖枝进行离体培养,探究室内暂养大叶藻离体生殖枝获取成熟种子的可行性,观察并描述了大叶藻离体生殖枝的开花、传粉、种子成熟、种子萌发、幼苗发育的动态过程以及大叶藻生殖枝、成熟种子、胚的解剖结构。实验结果表明:大叶藻生殖枝的结构对海水环境是高度适应的;花柱的形态变化是大叶藻开花过程的显著特点;大叶藻种子胚的结构较特殊,“U”型子叶包裹胚根、胚芽、胚轴,这导致了其特有的萌发过程;为了不错失种子收集良机,在不了解某地区大叶藻物候特性时,提前采收生殖枝并进行室内培养,是一种获取大叶藻种子的有效方法。四、以大叶藻早期发育阶段的3个发育时期为研究对象,利用液相氧电极技术对光合作用与呼吸作用进行了研究。结果表明:大叶藻早期发育阶段对外界环境因子的变化较为敏感,不同发育时期对呼吸作用的影响极显著(p<0.01),随着发育的推进暗呼吸速率对盐度的响应越不显著;温度、盐度、光合有效辐射对净光合速率的影响极显著(P<0.01),3因素之间的交互作用极显著(P<0.01),影响顺序为温度(F=42.264)>盐度(F=18.142)>光合有效辐射(F=7.699);低温(5℃、10℃)环境下大叶藻净光合速率对盐度更敏感,而在高温(20℃、25℃)环境下,其对光合有效辐射更敏感;高温(25℃)高盐(45)胁迫与低温(5℃)高盐(45)胁迫下大叶藻幼叶期的净光合速率偏低且出现负值。大叶藻早期发育阶段的生理生态特性有别于成体植株;通过对大叶藻早期发育阶段的深入研究,科学地划分大叶藻发育时期;根据每个时期的不同生理特性调节外部培养条件,以快速获得大叶藻优质苗株。
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