该研究采用mRNA差异显示技术对亚优2号低温敏感不育性进行了研究,建立了相应的基因克隆技术体系.以期获得籼粳亚种间低温敏感不育相关基因,为更好地利用籼粳亚种间杂种优势提供一些理论依据.细胞学观察发现,受到低温影响时,亚优2号幼穗花粉母细胞在减数分裂期染色体分裂出现异常现象.该研究共采用216种引物组合,对该杂种低温敏感不育的相关cDNA片段进行了分离,获得35条差异cDNA片段,这些差异主要表现在:有的基因在对照中特异表达,有的基因在处理中特异表达;有的基因在对照和处理中都表达,但表达量不同.这些差异条带可能对决定水稻籼粳杂种低温敏感不育的特性起着关键性作用,重扩增35条差异cDNA片段,结果26条差异cDNA片段能重复扩增.把这26条差异片段进行克隆.对其中的11个差异片段测序并进行序列比较,结果如下:DF1片段可能编码的蛋白质与水稻的类SNF2区域/解旋酶区域包含蛋白有一定的相似性.另外,还与富甘氨酸蛋白的氨基酸序列、普通烟草的富羟基脯氨酸糖蛋白前体、酵母的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶存在不同程度的相似性;DF2可能的编码产物与植物生长素调控蛋白存在较高的相似性.另外,还与大豆的生长素调控蛋白、玉米的过氧化氢酶存在一定的相似性;DF3可能编码的蛋白与TPR相关的包含蛋白、富组氨酸糖蛋白、锌指蛋白、CDC28/cdc2相关的蛋白激酶存在一定的相似性;DF4可能的产物与肽酶M1家族蛋白存在较高的相似性;DF9可能的编码产物与蛋白激酶C、细胞色素氧化酶Ⅲ、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、RRM型RNA结合蛋白均存在不同程度的相似性;DF11的碱基序列与位于水稻染色体4上的一段序列存在98％的同源性,该片断很可能来自水稻染色体4.DF12碱基序列与位于水稻染色体3的一段序列有很高的同源性,高达99％.另外还与其它染色体存在一定的同源性,推测该片段在水稻中可能为多拷贝的.该片段可能的编码产物与一种可能的逆转录因子多聚蛋白、玉米拷贝型pol多聚蛋白均存在一定的相似性;DF13的碱基序列与位于水稻染色体1的一段序列完全相同,该片段中的部分序列与水稻的蛋白磷酸化酶的序列也完全相同;DF14的碱基序列与位于水稻染色体3上的一段序列存在99％的同源性,可能来自水稻染色体3,其编码的产物与水稻的Ca依赖蛋白激酶、leukotriene A-4水解酶同源性很高.