荔枝FLOWERING LOCUST(FT)同源基因的克隆及功能研究

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ming20080904
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植物FLOWERING LOCUS T (FT)同源基因在成花过程中起着关键作用,最近FT蛋白已经被证明是开花素。本实验分离克隆了两个荔枝FT同源基因全长序列,分析其生物性息学特性,初步探讨其表达模式,并对其功能进行初步鉴定,为进一步阐明荔枝成花的分子机理提供依据。主要结果如下:1、荔枝FT同源基因克隆及生物信息学分析。利用RT-PCR方法首次获得了荔枝两个FT同源基因cDNA全长,分别命名为LcFT1和LcFT2(基因登录号:JN214350、JN214351)。两个基因开放阅读框(ORF)都为522bp,各编码174个氨基酸,其中LcFT1蛋白分子质量为19.65KD,等电点为8.68,LcFT2蛋白分子质量为19.56KD,等电点为7.34。蛋白质二级结构分析显示,LcFT1与LcFT2蛋白都具有4个α螺旋和10个β折叠区,和其它植物FT蛋白具有相似的结构。同源分析表明,LcFT1和LcFT2核苷酸同源性在不同植物间的一致性为72%-82%。2、荔枝FT同源基因的表达模式分析。利用RT-PCR方法首次得到了荔枝两个Actin同源基因cDNA全长,分别命名为LcActin4和LcActin7(基因登录号:HQ588865、HQ588866)。采用半定量RT-PCR分析表明,在‘三月红’荔枝花芽分化期LcFTl和LcFT2基因只在叶中表达,并且在成熟叶中表达量最多。3、荔枝FT同源基因的功能鉴定。构建植物表达载体35S::LcFT1和35S::LcFT2,通过农杆菌介导方法导入‘云烟97’烟草中。结果表明,转LcFT1、LcFT2基因烟草都显著提早开花,转LcFT1基因烟草炼苗移栽16天左右就花芽分化,转LcFT2基因烟草炼苗移栽30天左右花芽分化,而对照野生型需要85天左右花芽才分化,说明LcFT1和LcFT2可能在荔枝成花过程中有重要作用,但这两个基因的功能存在一定的差异。
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