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尖锐湿疣（Condyloma acuminata，CA）作为一种常见的性传播疾病，其发病原因已经明确，是由人乳头瘤病毒（HPV）感染所致的皮肤粘膜的良性增生。但其具体的发病机制仍不十分清楚，目前已有许多文献认为患者全身或局部免疫功能失衡在CA发病中起着重要的作用，因此，本研究将进一步探讨CA患者血清IL-10及IFN-γ水平的变化及患者外周血单个核细胞（PBMC）凋亡的变化；另一方面，CA是一种良性增生性病变，其细胞凋亡、端粒酶活性及蛋白构成很可能存在异常。因此，为了探讨上述问题，我们从不同的角度对其进行了研究：（1）CA皮损中细胞凋亡及端粒酶活性；（2）免疫调节剂卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）治疗CA后对患者血清IL-10及IFN-γ水平的影响；（3）BCG-PSN治疗CA后对患者PBMC凋亡的影响；（4）CA皮损总蛋白质双向凝胶电泳分析。 第一章：CA皮损中端粒酶活性及细胞凋亡 方法：随机选取60例CA患者，采用端粒重复序列扩增一酶标法（TRAP—ELISA）检测患者皮损中端粒酶活性，并与正常包皮组织做比较；原位末端标记法（TUNEL）检测皮损中凋亡细胞；免疫组化法检测患者皮损中凋亡相关分子Fas、FasL、TRAIL的表达水平。 结果：（1）60例CA患者中有54例（90％）CA皮损中端粒酶活性为阳性，A450值为0.501～2.760，明显高于正常包皮组织(仅1例为阳性，A450值为0.007～0.375)，两者有显著性差异（P＜0.01）；48例（80博卜学位论上 中义摘要％）皮损中凋亡细胞阳性，正常组织中凋亡细胞均为阴性；且在CA患者中端粒酶活性与凋亡指数呈显著负相关（，4．515，P二 0刀04人 （2）所有 CA皮损中（1000）Fas均为阳性，46例（76．7％）FasL阳性，42例（70％）TMIL卜性，正常表皮基本不表达 Fas、FasL、TRAIL。且FasL和 TRAIL分子表达程度与皮损区真皮层单个核细胞浸润呈显著负相关 ／一0．506和r—0．450，P＜0＊5）。 结论：门)端粒酶活性与细胞凋亡在CA皮损中明显增强；（）Fas系统参与了 CA皮损的细胞凋亡，Fas、FasL和 TRAIL介导的凋亡可能在 CA的发生与复发中起到重要的作用；门)FasL和 TRAIL可能通过通过直接或间接的方式影响皮损真皮局部单个核细胞的凋亡，从而使机体自身免疫能力降低。第二章：卡介菌多糖核酸对 CA患者血清 ILl 及 IFN－Y的影响 方法：将60例CA病人随机分为处理组30例（肌注BCG干SN＋局部电灼术＋全身常规抗病毒药物）和对照组30例（局部电灼术＋全身常规抗病毒药物人 采用双抗体夹心ELISA技术分别检测治疗前后两组思者血清 IL刁、IFN－Y水平，并与 2 5例健康对照者进行比较。 结果：与正常人比较，治疗前CA患者血清几l 水平显著增高，IFN－x水平显著降低，二者间 呈显著负相关（r＝－0．269，P＜0．05）；处理组治疗后的 IL习 水平显著降低而 IFN－Y水平显著增高，而对照组治疗前后的 ILl、IFN－Y水平无显著性差异，且处理组复发率低于对照组，有显著差异吓＜ 0．05人 结论：CA患者血清IL＊ 水平显著增高，IFN－Y水平显著降低，提示“患者存在仆1八 型细胞因子失衡，免疫调节剂BCG干SN治 且且博I－学位论义 中义摘要疗有助于改善此种失衡，并降低临床复发率。第三章：卡介菌多糖核酸对加患者叩以C凋亡的影响 方法：采用免疫组化法检测BCGPSN治疗前后处理组与对照组患者PBMC凋亡相关分子Fas、FasL、TRAIL的表达。采用TUNEL法检测凋亡细胞。 结果：治疗前CA患者PBMC中Fas、FasL、TRAIL分子的表达明显高于正常人o刃刀5人 且凋亡指数与Fas的表达程度呈正相关。BCGPSN治疗组经治疗后Fas、FasL、TRAIL的表达显著减少， （P＜0．05），而对照组则无差异（P＞0．05）。 结论：＊A患者P＊＊C存在异常的细胞凋亡，这可能是引起＊A患者细胞免疫功能受限，复发率高的另一重要因素。BCG干SN可能有助于提高患者的细胞免疫功能。第四章：蛋白质组技术在CA研究中的初步应用＊A皮损的蛋白质双向凝胶电泳分析） 方法：双向凝胶电泳技术Q．DE)分离 CA患者皮损组织与自身包皮组织的总体蛋白质，银染法获取凝胶电泳图象，ImageMast软件分析CA患者皮损组织蛋白质组的表达并将其与自身包皮组织进行比较。 结果：＊两者总蛋白质的分布模式非常相似：均以 PH 4。5－7．5和Mr25－70kD范围的蛋白质斑点分布最多，且两者在碱性端及小分于量处（与漠酚蓝分子量相近）均有明显深染的蛋白质点；o)在CA皮损图谱中探测到了约650个点，在对照包皮组织中探测到约550个点，并在CA皮损组织中发现了不能与对照包皮组织匹配的蛋白点287个 l且二博卜学位论义 中义摘要和表达丰度有显著差别 （ 0倍以上）的蛋白点 53个。 结论：O)＊A患者的