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目的 1.建立大鼠单纯胰腺移植(Pancreas transplantation alone, PTA)的缺血和再灌注(Ischemia/reperfusion, I/R)损伤动物模型;2.探讨不同热缺血时间下的I/R损伤对移植胰腺内分泌功能的影响;3.分析不同热缺血时间下的I/R损伤对移植胰腺细胞调亡的影响。 方法 用脲链霉素(Steptozozin, STZ)诱导的糖尿病SD大鼠行同基因异位PTA,供体取2/3节段性胰腺,供胰腺腹主动脉(含腹腔动脉及脾动脉)及门静脉(含脾静脉)与受体腹主动脉及左肾静脉分别行端侧和端端吻合(袖套式),供胰置于受体左髂窝,行胰肠重建(Enteric drainage,E-D重建式),用阻断脾动脉的方法来控制热缺血时间(0、15、30min),并由此将动物分为WIR 0组(n=25)、WIR 15组(n=25)和WIR 30组(n=25),冷缺血时间120min,建立在不同热缺血时间下,大鼠PTA的I/R损伤的动物模型。术后0.5h、3h、6h、24h及72h杀死大鼠查血糖,同时取胰腺组织,查组织中活性氧(Reaction oxygen species, ROS)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)和一氧化氮(Nitric oxic, NO),组织石蜡包埋后切片采用HE染色观察组织学变化及切口末端标记技术(dUTP nick end labeling, TUNEL)法查凋亡细胞。 结果 1.各组再灌注后3h血糖开始下降,24h后下降逐渐缓慢,趋于稳定。表明再灌注后胰腺内分泌功能很快开始恢复,术后1d内最快,术后24h和72h变化不大,WIR 30组在术后3、6h血糖的恢复程度显著低于WIR 0组(P<0.01)和WIR 15组(P<0.05),WIR 15组低于WIR 0组(P<0.05)。2.各组再灌注后0.5h胰腺组织即发生ROS、MDA和NO的改变,3h和6h最为 第四军医大学硕士研究生毕业论文 显著;此时mn3o组mS和mA高于们no(R0.01)和们R15组(R0.05); WIR 15高于 WIR 0组(P<0.05);NO值 WIR 30组低于 WIR 0组(P<0.of) 和WIR 15组(P<0.05);WIR 15组低于WIR 0组(P<0.05)。3.再灌注后 0.sh各组即可见TUNEL阳性细胞分布,以胰岛内及微血管周围组织为著, 随后向胰腺外分泌区扩散,6h达到高峰:24卜时仍高分布,再灌注后6h, WIR 30组的凋亡指数(Apoptosis index,AI)显著高于 WIR 0组(P<0.of)和 WIR 15组(P<0.05);WIR 15组高于 WIR 0组(P<0.05)。 结论1.在同样背景的冷缺血时间下,热缺血时间越长,胰腺内分泌功 能恢复越慢。2.胰腺的内分泌系统较外分泌系统对1爪的耐受性差;3.热缺 血时间30min对胰腺组织己有较大的损害,并主要以细胞凋亡的形式表现。