同基因大鼠异位单纯胰腺移植缺血再灌注损伤与细胞凋亡的相关性实验研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenyanqing
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目的 1.建立大鼠单纯胰腺移植(Pancreas transplantation alone, PTA)的缺血和再灌注(Ischemia/reperfusion, I/R)损伤动物模型;2.探讨不同热缺血时间下的I/R损伤对移植胰腺内分泌功能的影响;3.分析不同热缺血时间下的I/R损伤对移植胰腺细胞调亡的影响。 方法 用脲链霉素(Steptozozin, STZ)诱导的糖尿病SD大鼠行同基因异位PTA,供体取2/3节段性胰腺,供胰腺腹主动脉(含腹腔动脉及脾动脉)及门静脉(含脾静脉)与受体腹主动脉及左肾静脉分别行端侧和端端吻合(袖套式),供胰置于受体左髂窝,行胰肠重建(Enteric drainage,E-D重建式),用阻断脾动脉的方法来控制热缺血时间(0、15、30min),并由此将动物分为WIR 0组(n=25)、WIR 15组(n=25)和WIR 30组(n=25),冷缺血时间120min,建立在不同热缺血时间下,大鼠PTA的I/R损伤的动物模型。术后0.5h、3h、6h、24h及72h杀死大鼠查血糖,同时取胰腺组织,查组织中活性氧(Reaction oxygen species, ROS)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)和一氧化氮(Nitric oxic, NO),组织石蜡包埋后切片采用HE染色观察组织学变化及切口末端标记技术(dUTP nick end labeling, TUNEL)法查凋亡细胞。 结果 1.各组再灌注后3h血糖开始下降,24h后下降逐渐缓慢,趋于稳定。表明再灌注后胰腺内分泌功能很快开始恢复,术后1d内最快,术后24h和72h变化不大,WIR 30组在术后3、6h血糖的恢复程度显著低于WIR 0组(P<0.01)和WIR 15组(P<0.05),WIR 15组低于WIR 0组(P<0.05)。2.各组再灌注后0.5h胰腺组织即发生ROS、MDA和NO的改变,3h和6h最为 第四军医大学硕士研究生毕业论文 显著;此时mn3o组mS和mA高于们no(R0.01)和们R15组(R0.05); WIR 15高于 WIR 0组(P<0.05);NO值 WIR 30组低于 WIR 0组(P<0.of) 和WIR 15组(P<0.05);WIR 15组低于WIR 0组(P<0.05)。3.再灌注后 0.sh各组即可见TUNEL阳性细胞分布,以胰岛内及微血管周围组织为著, 随后向胰腺外分泌区扩散,6h达到高峰:24卜时仍高分布,再灌注后6h, WIR 30组的凋亡指数(Apoptosis index,AI)显著高于 WIR 0组(P<0.of)和 WIR 15组(P<0.05);WIR 15组高于 WIR 0组(P<0.05)。 结论1.在同样背景的冷缺血时间下,热缺血时间越长,胰腺内分泌功 能恢复越慢。2.胰腺的内分泌系统较外分泌系统对1爪的耐受性差;3.热缺 血时间30min对胰腺组织己有较大的损害,并主要以细胞凋亡的形式表现。
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