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麝鼠(Ondatra zibethicus)是一种季节性多次发情繁殖的经济动物,其尾腹部香腺形态呈现明显的季节变化,即繁殖期发育膨大而非繁殖期萎缩变小。成年雄性麝鼠在繁殖期分泌的麝鼠香具有与天然麝香相同的主要成分及药理作用,具有替代天然麝香的潜质,因此,探索香腺发育机制和泌香机制从而提高麝鼠香产量尤为必要。细胞程序性死亡在生物体发育过程中普遍存在,是细胞为维持内环境稳态而主动启动并受基因调控的自杀保护措施,Necroptosis和Macroautophagy属于细胞程序性死亡方式。Necroptosis诱导细胞坏死样凋亡;Macroautophagy即巨自噬,指溶酶体介导的细胞自身降解过程,借以维持细胞本身的代谢需要和对某些细胞器的更新。本研究采集不同月份的麝鼠香腺,对其分别进行了形态学观察、荧光定量PCR(RT-qPCR)检测和免疫印迹(Western blotting)分析。形态学结果表明,2月末到4月末香腺快速发育,5月末到7月末香腺形态相对稳定,8月末香腺表皮出现皱缩且体积明显缩小,9月末香腺继续萎缩变小;通过荧光定量PCR技术检测Necroptosis通路相关基因和Macroautophagy通路相关基因的表达,得出不同时期这些基因mRNA表达规律,并通过免疫印迹检验,从而探讨这些基因对麝鼠香腺发育或萎缩的影响。本实验共36个样品,每个样品设置3个技术性重复,统计分析Necroptosis通路功能基因MLKL和Necroptosis相关基因 rip1、rip3、PGAM5、DRP1、p65、自噬标志物 LC3-Ⅱ 和 Macroautophagy 相关基因 ULKL、fip200、ATG13、PI3Kcb、Akt、mTOR、Beclin1(ATG6)、JNK、DAPK、LKB1(stk11)、AMPK、TSC1、p62、ATG9b、ATG2a、有关细胞凋亡的 BCL2、BAX、Caspases3 基因的转录水平变化。相较于 Ozsg2 组,Ozsg3、Ozsg4、Ozsg5、Ozsg7、Ozsg8、Ozsg9、Ozsg10实验组MLKL基因的转录水平分别为Ozsg2组的1.49倍、1.7倍、3.13倍、2.1倍、8.38倍、15.22倍、13.3倍,实验组LC3-Ⅱ基因的转录水平分别为Ozsg2组的1.9倍、2.42倍、2.76倍、2.45倍、4.76倍、5.58倍、5.04倍;实验组BCL2基因的转录水平分别为Ozsg2组的1.21倍、1.04倍、0.57倍、0.6倍、0.47倍、0.48倍、0.47倍。随着月份的递增,MLKL基因和LC3-Ⅱ基因在香腺中的表达量呈上调趋势,BCL2基因在香腺中的表达量呈下调趋势,在香腺快速发育对比快速萎缩时期的表达差异显著(P<0.05)。Western blotting结果与qPCR实验结果相一致,p65和mTOR在2月和4月的麝鼠香腺中的蛋白水平较高,在9月中的蛋白水平最低。提示在2月到4月的麝鼠香腺快速发育期,BCL2等促细胞生存基因调控香腺细胞生存抑制香腺细胞死亡,从而促进麝鼠香腺发育和香腺功能;LC3-Ⅱ等促自噬基因诱导香腺萎缩或开始萎缩时的细胞发生自噬,促进麝鼠香腺萎缩;MLKL等促细胞死亡基因在麝鼠香腺萎缩时调控香腺细胞死亡。