姜黄素对大鼠角膜新生血管作用的实验研究

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本文主要从以下几个部分展开论述:  第一部分 姜黄素对大鼠角膜新生血管抑制作用的实验研究  目的:探讨姜黄素对大鼠角膜新生血管(CNV)抑制作用。  方法:40只Wistar大鼠随机分为4组,各组大鼠角膜角膜均以碱烧伤建立角膜新生血管模型,A组为对照组,结膜下注射生理盐水,B、C、D组为姜黄素治疗组,结膜下注射浓度分别为10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L姜黄素溶液,在碱烧伤后的第1、4、7、14、21天裂隙灯下动态观察大鼠角膜新生血管生长情况,并测量角膜新生血管长度,计算角膜新生血管面积,于上述各时间点断颈处死大鼠后立取角膜组织作病理切片观察。  结果:不同浓度姜黄素均可显著抑制角膜新生血管生长,40μmol/L浓度组抑制作用最明显。在碱烧伤后各个时间点,治疗组新生血管面积均小于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。角膜组织病理学检查结果提示:治疗组角膜组织中炎性细胞浸润及新生血管数量均少于对照组。  结论:姜黄素对大鼠角膜碱烧伤后CNV的形成及生长有显著抑制作用。  第二部分 姜黄素抑制大鼠角膜新生血管机制的初步研究  目的:探讨姜黄素是否抑制血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthesis,iNOS)的表达。  方法:36只Wistar大鼠随机分为3组:正常阴性对照组A,6只Wistar大鼠,角膜不作任何处理;其余30只Wistar大鼠左眼作为CNV实验对照组B,右眼作为CNV实验干预组C。于模型建立后第一天开始C组每天结膜下注射浓度为40μmol/L姜黄素溶液,B组给于生理盐水。各组动物分别在造模后第1天、第4天、第7天、第14天、第21天断颈处死,立即取角膜组织,免疫组化和RT-PCR等方法分别检测使用姜黄素前后各时期角膜组织中VEGF和iNOS的表达情况,并进行统计学分析。  结果:免疫组化染色,VEGF和iNOS在正常角膜上皮基底细胞有弱表达,新生血管对照组表达明显增强,其表达主要分布在新生血管形成区域和上皮全层;结膜下注射组表达明显减少;VEGFmRNA和蛋白表达一致。  结论:姜黄素通过抑制VEGF和iNOS的表达来抑制碱烧伤后大鼠角膜新生血管形成。
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