黄曲霉毒素B1对雏鸡免疫器官影响的研究

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本研究选用1日龄艾维茵公雏180只,随机分为4组,分别饲喂对照组日粮(玉米-豆粕型基础日粮)和AFB1日粮(AFB1、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组日粮中AFB1添加量分别为0.15mg/kg.0.3mg/kg和0.6mg/kg)。试验期21天,采样点为实验第7、14和21天,采用组织病理学方法、流式细胞术法、生物化学法和ELISA法观察AFB1对胸腺、法氏囊和脾脏的影响。研究结果显示:与对照组比较,AFB1Ⅱ、Ⅲ组雏鸡料肉比增高,免疫器官脏器指数下降。光镜下,AFB1Ⅱ、Ⅲ组胸腺髓质区淤血,皮质区多数网状细胞核形态不清晰,周围均见有较多细胞核碎片;法氏囊滤泡髓质区淋巴细胞明显减少,皮质及髓质均出现大量小空洞,空洞内细胞核碎片显著增多;脾脏红髓区淤血,脾小结及动脉周围淋巴鞘出现一定量空洞,细胞核碎片增多。电镜下,AFB1Ⅲ组胸腺细胞核周隙扩张,线粒呈空泡状,凋亡细胞增多,并常位于网状细胞附近或网状细胞胞浆内;法氏囊凋亡细胞数量增多,部分凋亡细胞被网状细胞吞噬;脾脏细胞核周隙扩张,线粒体肿胀,凋亡细胞数量增多。AFB1Ⅱ、Ⅲ组雏鸡脾脏非酶抗氧化物GSH含量降低,抗氧化酶GSH-Px、GR和CAT活性下降,脂质过氧化产物MDA含量升高。流式细胞术与TUNEL染色法显示AFB1Ⅱ、Ⅲ组雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏细胞凋亡率增加,脾脏和血液中CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞的比例不同程度下降,胸腺中凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达增加,Bcl-2表达减少;法氏囊中仅Caspase-3的表达量增加;而脾脏中3种凋亡蛋白的表达均微量。AFB1Ⅱ、Ⅲ组血清IL-2、IFN-γ及IgG、IgA和IgM的含量减少。研究结果表明:日粮中AFB1含量为0.3mg/kg及0.6mg/kg时,雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏出现不同程度的病理损伤;雏鸡脾脏抗氧化能力下降,脂质过氧化产物增多,导致过氧化损伤;雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏凋亡细胞增多,凋亡上调的机制与促凋亡蛋白的过表达有关,且3个免疫器官的凋亡调节机制存在差异;雏鸡血液和脾脏中成熟T淋巴细胞的比例降低,血清IL-2和IFN-γ的含量减少,与胸腺结构和功能的损伤密切相关;雏鸡血清IgG、IgA和IgM的含量减少,与法氏囊和脾脏的结构和功能受损密切相关。
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